Figure 3. Stepping Behavior of Exte

Figure 3. Stepping Behavior of Extended Kinesin Mutants(A) Kinesin motors were labeled with a single quantum dot on one head, and head movement was recorded with 70 ms integration time. Stepping traces of WT (blue), 6P (wine), 13P (black), 19P (cyan), 26P (navy), and 14GS (olive), fitted with a step detection program (red lines) (Kerssemakers et al., 2006). Motor velocity was kept in the range of 10–15 nm/s by adding different concentrations of ATP for each construct (1 μM for WT, 15 μM for 6P and 13P, 25 μM for 19P, 40 μM for 26P, and 100 μM for 14GS) (see Experimental Procedures for details). The inset shows the randomness parameter (r) calculated from the dwell time measurements and suggests a coupling defect for extended kinesins (mean ± SD).(B) A histogram of analyzed step sizes along the microtubule axis shows that the WT head moves with a consistent 16 nm step, whereas the head of the neck mutants takes highly variable steps that show peaks at multiples of ∼8 nm. The number of analyzed steps (Nstep) and probability for each construct to take a backward step (pBW) are indicated in each panel.(C) Available binding sites (black circles) for the rear head in the microtubule plus end direction.(D), (E), and (F) Traces showing motor head displacement parallel (black trace) and perpendicular (blue trace) to the long microtubule axis for WT, 14GS, and 26P, respectively. Vertical dotted lines indicate diagonal steps. The inserts show histograms of sideways step sizes, separated into left and right directions. The overall probability of taking a sideways step (psw) is shown on each panel.

結果 (中文) 1:

如图3所​​示。步进扩展驱动蛋白突变体（）驱动蛋白马达与单量子点标记上一个头，录得70毫秒积分时间和头部运动的行为。步进痕迹（重量）（蓝色），六段（葡萄酒），13p的（黑色），19便士（青色），26P（深蓝），14gs（橄榄油），配有一个步骤检测程序（红色线）（kerssemakers等， 2006年）。电机速度保持在10-15 nm / s时的范围内，通过添加不同浓度的ATP对每个构建体（（重量）为1微米，15微米6p和13p的19便士，25微米，40微米26P，和100μm的14gs）（见实验程序的详细信息）。插图示出的随机性参数相关（r）计算从停留时间的测量和，表明耦合缺陷延长动蛋白（平均值±标准差）。（b）一种分析的步长沿微管轴的直方图显示的头（重量）与移动一致16nm的步骤中，而头颈部突变体需要显示峰在〜8nm的倍数的高度可变的步骤。分析步骤（n步骤）的概率为每个构造采取倒退（PBW）的数量表示每个面板。（四（三）结合位点（黑圈），后排头部微管正端方向。 ），（五），（六）的痕迹，显示电动机头平行位移（黑色线）和垂直（蓝色曲线），以长微管轴的重量，14gs 26P，分别垂直虚线表示对角线步骤。插入显示直方图，侧身步长，分离成左，右方向。每个面板上显示一个侧身一步（PSW）的整体概率。

結果 (中文) 2:

图3。扩展蛋白突变体的行为（一）驱动蛋白马达步进标有一头的单量子点，和头部运动是70毫秒积分时间记录。步进跟踪WT（蓝色），6P（酒），磷（黑色），19p（青色），开发（海军），和14gs（橄榄），配有一步检测程序（红线）（总等人。，2006）。电机速度保持在10–15 nm / s的范围内，加入不同浓度的ATP的每个构造（1μ米的重量，15μM 6p和磷，25μM 19p，40的开发，μM和100 Mμ14gs）（详见实验程序）。插图显示随机参数（R）的停留时间的测量和显示扩展的动蛋白偶联缺陷，计算（平均±SD）。（b）直方图分析的步骤大小沿微管轴显示一致的16 nm步WT头移动，而头颈部突变体的高度重视可变的步骤，显示在8 nm峰∼倍数。分析步骤数（nstep）和概率为每一个建设向后退一步（PBW）是在每个面板显示。（C）结合位点（黑眼圈）为后面的头在微管加端方向。（d），（e）和（f）的痕迹，显示马达头位移平行（黑色轨迹）和垂直（蓝线）为重量，长14gs微管轴，和开发，分别。垂直的虚线表示对角步。插入侧步大小的直方图显示，分为左、右方向。以横向一步总体的概率（PSW）在每个显示面板。

結果 (中文) 3:

图 3。步进驱动行为的扩展驱动蛋白 Mutants(A) 蛋白电动机都标有一个头上的单量子点和头部运动录与 70 毫秒积分时间。步进的痕迹 WT （蓝色）、 6 P (酒)、 13 P (黑色)、 19 P （青色）、 26 P (海军) 和 14GS (橄榄)，装有一个步骤检测程序 (红线) (Kerssemakers et al，2006年)。电机速度保持在 10-15 nm/s 通过添加不同浓度的 ATP 每个构造 （WT、 6 P 和为 26 P P 19 P、 40 μ M 为 25 μ M 13 15 μ M 和 14GS 为 100 μ M 为 1 μ M） 的范围内 （见实验程序的详细信息）。插图显示了从居住时间测量计算参数的随机性 (r)，并建议 （平均 ± SD） 的扩展驱动蛋白偶联缺陷。(B) 分析的步大小沿微管轴的直方图显示的 WT 头移动以保持一致的 16 毫微米步，而脖子突变的头花在 ∼8 nm 的倍数显示山峰的高度可变步骤。数量分析步骤 (Nstep)，每个构造采取后退了一步 (pBW) 的概率表示在每个面板。(C) 可用微管再加上结束的方向的后方头绑定站点 （黑色圆圈）。(D)、 (E) 和 (F) 痕迹显示电机头位移平行 （黑色跟踪） 和 WT、 14GS 和 26 P 的长微管轴与垂直 （蓝色跟踪）分别。垂直虚线表示对角的步骤。插入显示侧身一步大小，分隔成左、 右方向的直方图。每个面板上显示了一侧身步 (psw) 的总体概率。