Histology and Immunohistochemistry.

Histology and Immunohistochemistry. For human
liver biopsies, paraffin-embedded livers were deparaffinized
and stained for RIP3 as described above, except that 3-amino-9-ethylcarbazole was used instead of
3,3’-diaminobenzidine as the horseradish peroxidase–
specific chromogen. Omitting the primary antibody
(no primary immunoglobulin G control) in this protocol
abrogated the staining, demonstrating the specificity
of the immunoreactive staining (data not shown).
Images were acquired in a blinded manner using a
20
objective. RIP3 immunostaining was then scored
by an experienced pathologist (X. Liu) taking into
consideration staining intensity and percentage of positive
cells using a scale of 0-3 (0, lack of any staining;
1, faint staining in 50% cells or coarse granular staining in >20% cells).
A subset of these subjects was analyzed via morphometric
semiquantitation analysis using Image-Pro Plus
software (n ¼ 6 for control and n ¼ 11 for ALD
cases).

結果 (中文) 1:

组织学和免疫组化。人为肝穿刺活检，石蜡包埋的肝脏被 deparaffinized和染色为 RIP3 上文所述，而不是以前 3-氨基-9-乙基咔唑3，3'-二氨基联苯胺作为辣根过氧化物酶 — —具体色原。省略主要抗体(没有原发性免疫球蛋白 G 控制) 本议定书废除染色，表明特异性免疫组织化学染色 (数据未显示)。获得图像盲法的方式使用20 目的。然后分 RIP3 免疫组化由经验丰富的病理学家 (十、 刘) 考虑到审议染色强度和阳性的百分比单元格使用其小数位数为 0-3 (0，缺乏任何染色;1，淡淡染色在 < 10%的细胞;2，细颗粒状在 10%-50%的细胞染色或粗颗粒状染色在 10%-20%的细胞;3，细颗粒状染色> 50%的细胞或粗颗粒状染色 > 20%的细胞)。这些科目的一个子集是通过形态计量学分析semiquantitation 分析使用图像 Pro 加软件 (n 为控制 ¼ 6 和 n ¼ 11 对于 ALD例)。

結果 (中文) 3:

组织学及免疫组织化学。人类
肝活检，石蜡包埋肝经脱蜡和染色
RIP3如上所述，除了固定代替
3,3'-二氨基联苯胺为辣根过氧化物酶–
特定发色团。省略的主要抗体
（无原发性免疫球蛋白G控制）协议中
废除染色，展示的阳性染色特异性
（数据未显示）。
图像使用的是
20
目的在双盲的方式获得。RIP3表达然后由有经验的病理学家取得了
（刘迅）考虑到
考虑染色用0-3的规模
阳性细胞数和强度（0，缺乏任何染色；
1，淡淡的染色，在< 10%的细胞；2，细颗粒
染色在10% - 50%细胞或粗颗粒染色
在10% - 20%的细胞；3，细颗粒状的染色
> 50%细胞或粗颗粒状染色> 20%细胞）。
这些受试者的一个子集是通过使用Image-Pro Plus软件半定量分析
形态
（N¼6控制N¼11例ALD
）。