Microspore culture was performed as

Microspore culture was performed as previously described by Lu et al. (2008). Briefly, the collected spikes were subjected to cold pretreatment at 4 ?C for 2 weeks, and the microspores were collected by crushing the anthers from the sterilized spikes. The collected microspores were isolated by filtration and centrifugation, and finally cultured on the induction medium (N6 basal medium supplemented with 2.0 lM 2.4-D, 2.3 lM KT, and 0.25 M maltose) for embryogenic callus induction. The isolated microspores cultured on the induction medium were used as control group (Control group), and those cultured in the medium containing 500 mg L -1 NaCl were designed as salt-treated group (Salt group). Four biological replicates were prepared for each groups. The microspores in each biological replcate were isolated from at least 20 donor plants, and equally divided into two parts used for two groups. After 21 days of culturing, the formed embryogenic calli in each dish (one
replicate) were separated from liquid culture medium and
measured to calculate the callus yield per dish. Small
amount (*30 mg) of embryogenic calli were collected into
tubes by snap frozen in liquid nitrogen and then stored at
-80 ?C for RNA isolation. The remaining embryogenic
calli were weighed again and transferred to differentiation
medium(MS basal medium supplemented with 2.2 lM
6-BA,7.0 lM KT, 0.25 lM NAA and 83.3 mM maltose) as
described by Lu et al. (2008) for plant regeneration (without
salt treatment). The numbers of green plants per dish were
counted after 1 month of culturing

結果 (中文) 1:

小孢子培养技术进行如上文所述的路等人 （2008 年）。简单地说，收集的穗状花序遭受低温预处理在 4？2 个星期，C 和小孢子征收粉碎消毒的穗状花序从花药。收集小孢子分离过滤和离心，和最后的胚性愈伤组织诱导培养基上诱导培养基 （辅以 2.0 的 lM 2.4-D、 2.3 lM KT 和 0.25 M 麦芽糖 N6 培养基）。小孢子诱导培养基上培养被用作控制组 （对照组），和那些在含有 500 毫克 L-1 培养基培养氯化钠被设计成盐治疗组 （盐）。为每个组编写了四个生物复制。在每个生物的 replcate 小孢子分离从捐助者至少 20 家工厂，并同样分为两个部分用于两组。经过 21 天的培养，形成胚性愈伤组织在每个盘子里 （一个复制） 从液体培养基中分离了出来，测定，计算每道菜的愈伤组织产量。小金额 (* 30 毫克) 的胚性愈伤组织被集中到由管理单元液态氮冷冻，然后储存在管-80 吗？Rna 的 C。剩余的胚性权衡再三，转入分化愈伤组织介质 (2.2 MS 基本培养基 lM6-BA、 7.0 lM KT、 0.25 lM NAA 和 83.3 毫米麦芽糖) 作为描述由路等人 （2008 年） （无再生植株盐处理）。绿色的植物，每道菜数1 个月的培养后计数

結果 (中文) 2:

如先前由Lu等人所述进行孢子培养。（2008）。简要地，所收集的尖峰在4经受冷预处理2 C 2周，并通过从灭菌尖峰粉碎花药收集孢子。所收集的孢子通过过滤和离心分离，最后将诱导培养基上培养胚性愈伤组织诱导（补充有2.0莫耳2.4-D，2.3莫耳KT，和0.25M的麦芽糖N6基本培养基）中分离。诱导培养基上培养的分离的小孢子用作对照组（对照组），并在含500毫克的L培养基中的那些培养-1 NaCl的设计为盐治疗组（盐组）。四生物学重复是为各组准备。在每个生物replcate孢子是从至少20供体植物分离 并等分为用于两个组中的两个部分。
后培养21天后，在每个培养皿（一个所形成的胚发生愈伤组织复制）从液体培养基中分离出来，并
测定，计算每个培养皿的愈伤产量。小
胚性愈伤组织的量（* 30毫克）收集到
通过卡扣管在液氮中冷冻，然后储存在
-80 4 C用于RNA分离。剩余胚
愈伤组织再次称重并转移到分化
培养基（补充有2.2莫耳MS培养基
如6-BA，7.0莫耳KT，0.25莫耳NAA和83.3毫麦芽糖）
由Lu等人所述。（2008）植株再生（无
盐处理）。每盘绿色植物的数字是
1个月培养后计算

結果 (中文) 3:

小孢子培养为鲁等人先前所描述的进行。（2008）。简单地说，收集到的尖峰进行冷预处理在4？C 2周，并被粉碎的花药小孢子从消毒后的尖峰收集。通过过滤和离心分离收集的小孢子，最终培养的诱导培养基（N6培养基中添加2流明、2.3流明，KT和0.25米的麦芽糖）的胚性愈伤组织的诱导。的游离小孢子培养的诱导培养基作为对照组（对照组），并培养在培养基中含有500 mg L - 1的NaCl为盐治疗组（对照组）。为每一组制备了四个生物复制。从至少20个供体植物中分离出的每个生物replcate小孢子，分为两部分用于两组。经过21天的培养，在每一道菜中形成的胚性愈伤组织（一个复制）从液体培养基中分离和测量计算每盘愈伤组织的产量。小采集到的胚性愈伤组织的数量（×30毫克）管子被冻结在液氮中，然后储存在80？RNA隔离。剩下的胚愈伤组织再次称重，并转移到分化培养基（MS培养基中添加2.2的LM6-BA、KT 7流明，0.25流明的NAA和83.3毫米为麦芽糖）由陆等人所描述。（2008）用于植物再生（不含盐处理）。每盘菜的数量是培养1个月后计数