Most recently, we adapted a pharmac

Most recently, we adapted a pharmacological inhibitor assay for the measurement of the inhibitory capacity of neutralizing anti‐FXIII‐A antibody by determining the antibody concentration required for 50% inhibition of FXIII (IC50). In this assay the combined inhibition of FXIII activation and FXIIIa activity is measured. Various concentrations of the patient's IgG or normal IgG are pre‐incubated with plasma FXIII, then FXIII is activated by thrombin and Ca2+ and FXIII activity is measured. Normal IgG had no effect on FXIII activity, and the IC50 value for the patient's IgG could be calculated (an IC50 tool kit is useful for the calculation; www.ic50.tk). A typical IC50 curve 23 is shown in Fig. 2(B). This assay was used in two further studies for the quantification of neutralizing anti‐FXIII‐A antibodies 24, 25. The advantage of IC50 determination over the Bethesda‐Nijmegen assay is the exact information on the inhibitory capacity of the antibody. Its disadvantage is the requirement of purified FXIII and IgG.In rare cases the anti‐FXIII antibody did not inhibit FXIII activity measured by an amine incorporation assay, but it caused impaired cross‐linking of fibrin chains. These type III antibodies are detected by monitoring the cross‐linking of fibrin γ‐ and α‐chains using SDS PAGE analysis of the fibrin clot 17, 18, 26. The inhibition of fibrin chain cross‐linking might also be a result of an antibody directed against fibrin(ogen) and not against FXIII 18.

結果 (繁體中文) 1:

最近，我們通過確定FXIII的50％抑制（IC 50）所需的抗體濃度適於中和性抗FXIII-A抗體的抑制能力的測定藥理學抑製劑測定。在該測定中FXIII活化和FXIIIA活性的組合抑制被測量。患者的IgG或IgG的正常的不同濃度的預溫育與血漿FXIII，然後FXIII被凝血酶和Ca 2+和FXIII活性的方法激活。正常的IgG對FXIII活性沒有影響，並且可以計算出患者的IgG的IC 50值（其IC 50工具包是用於計算有用; www.ic50.tk）。典型的IC 50曲線23被示於圖2（B）。該測定在兩個另外的研究中用於中和性抗FXIII-A抗體24,25的定量。的IC 50測定在貝塞斯達奈梅亨測定的優點是在抗體的抑制能力的確切信息。它的缺點是純化FXIII和IgG的要求。

在罕見的情況下，抗FXIII抗體不通過胺摻入法測得的抑制FXIII活性，但它造成受損的纖維蛋白鏈的交聯。這些類型III抗體由監測的交聯血纖維蛋白檢測γ-和使用所述纖維蛋白凝塊17，18，26，纖維蛋白鏈的交聯威力的抑制也可以是抗體的結果的SDS PAGE分析α鏈針對纖維蛋白（原），而不是針對FXIII 18。

結果 (繁體中文) 2:

最近，我們通過確定FXIII（IC50）抑制50%的抗體濃度，調整了藥理抑制劑測定方法，用於測量中和抗FXIII-A抗體的抑制能力。在此測定中測量了FXIII啟動和FXIIIa活性的組合抑制。患者IgG或正常IgG的各種濃度用血漿FXIII預孵育，然後通過血栓和Ca2+啟動FXIII，並測量FXIII活性。正常IgG對FXIII活性沒有影響，可以計算患者IgG的IC50值（IC50工具組可用於計算;www.ic50.tk）。典型的 IC50 曲線 23 如圖 2（B） 所示。這種測定用於兩項進一步的研究中，用於中和抗FXIII_A抗體的定量24，25。與貝塞達-尼梅根測定結果IC50測定的優點是抗體抑制能力的確切資訊。其缺點是純化FXIII和IgG的要求。

在極少數情況下，抗FXIII抗體不抑制通過胺結合測定測量的FXIII活性，但它導致纖維蛋白鏈的交聯受損。這些III型抗體是通過監測纖維蛋白的交聯和β鏈的交叉連結，使用SDS PAGE分析纖維蛋白凝固物17，18，26。纖維蛋白鏈交聯的抑制可能也是針對纖維蛋白（ogen）的抗體的結果，而不是針對FXIII 18的結果。

結果 (繁體中文) 3:

最近，我們採用了一種藥理學抑制試驗，通過測定50%抑制FXIII（IC50）所需的抗體濃度來量測中和抗FXIII-a抗體的抑制能力。本實驗測定了FXIII活性和fxiia活性的聯合抑制作用。將患者不同濃度的IgG或正常IgG與血漿FXIII預孵育，然後用凝血酶啟動FXIII，測定Ca2+和FXIII活性。正常IgG對FXIII活性無影響，可計算患者IgG的IC50值（IC50工具包可用於計算；www.IC50.tk）。典型的IC50曲線23如圖2（B）所示。本試驗用於進一步的兩項研究，以定量測定24、25號中和性抗FXIII-A抗體。與Bethesda-Nijmegen法相比，IC50測定法的優點是能準確反映抗體的抑制能力。缺點是需要純化的FXIII和IgG。
在極少數情况下，抗FXIII抗體不抑制胺摻入法測定的FXIII活性，但它導致纖維蛋白鏈交聯受損。通過對纖維蛋白凝塊17、18、26進行SDS-PAGE分析，監測纖維蛋白γ鏈和α鏈的交聯，檢測出這些III型抗體。抑制纖維蛋白鏈交聯也可能是針對纖維蛋白（原）而不是針對FXIII 18的抗體的結果。