mass spectrometry (HPLC–MS). The us

mass spectrometry (HPLC–MS). The use of hydrophobicseparation combined with selective mass spectrometricdetection makes this a versatile analytical tool. Electrosprayis currently the most widely used ionization source. Theelectrospray interface produces singly or multiply chargeions directly from an aqueous–organic solvent system bycreating a fine spray of highly charged droplets in thepresence of a strong electric field, with the assistance of heator pneumatics. The successful formation of ions usingelectrospray ionization requires two steps: the transfer of thecompound of interest into the gas phase and the addition ofa charge to the analyte if it is not already in a charged state[1–4].HPLC–MS systems using an electrospray ion sourcecoupled with tandem mass analyzers (HPLC–ESI–MS/MS)have been applied to a wide variety of studies inpharmaceutical analysis and life sciences. With HPLC–ESI–MS/MS now considered the benchmark for measurementof drugs and their metabolites in biological matrices[5], the high selectivity of tandem mass spectrometry, withsuccessive mass filtrations, leads to little or no observedinterference even though there may be relatively highconcentrations of coextracted and coeluted matrix componentspresent. These characteristics have led to a growingtrend of high-throughput analysis that incorporates little orno sample preparation and minimal chromatographicretention [6–8].With HPLC–ESI–MS/MS having these characteristics ofhigh selectivity, sensitivity, and throughput, it is notsurprising that this technology is being increasingly usedin the clinical laboratory. A recent review by Dooley [9]reported an exponential growth from 1991 to 2001 inclinical chemistry papers that mention tandem massspectrometry. It is now accepted that HPLC–ESI–MS/MSis the method of choice for screening for inherited metabolicdisorders [10], but it can be expected that many moreapplications will follow. While many biochemical markerssuch as steroids, fatty acids, amino acids, catecholamines,and thyroxine have been measured by this analyticaltechnique [11–15]. Specific examples of clinical laboratoriesapplying HPLC–ESI–MS/MS to drug quantification arefor the therapeutic drug monitoring of immunosuppressantdrugs [16] and protease inhibitors [17], and toxicologicalinvestigations [18,19].While HPLC–ESI–MS/MS offers much promise forclinical laboratories, one issue that must be addressed inmethod development, validation, and routine use is matrixeffects. Matrix effects are the alteration of ionizationefficiency by the presence of coeluting substances. A recentpaper by Annesley [20] highlighted the importance ofunderstanding matrix effects in clinical mass spectrometryapplications, and although critical to the success of anHPLC–ESI–MS/MS analytical method, few publishedmethods adequately address this problem [21]. The aim ofthis report is to provide an overview of matrix effects andfrom a clinical laboratory perspective show how this issue

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質譜（HPLC-MS）。使用疏水性的 分離選擇性質譜聯合 檢測使得這一個多功能的分析工具。電 是目前使用最廣泛的電離源。該 電接口產生單或多電荷 從水-有機溶劑體系中通過直接的離子 在創建高度帶電的液滴的細噴霧 的強電場的存在下，用熱的幫助 或氣動。在用離子成功地形成 電噴霧離子化需要兩個步驟：在轉移 目標化合物成氣相和加入 的電荷到分析物，如果它不是已在充電狀態 [1-4]。 使用電噴霧離子源HPLC-MS系統 加上串聯質譜分析儀（HPLC-ESI-MS / MS） 已應用於各種各樣的研究中 藥物分析和生命科學。與HPLC- ESI-MS / MS現在考慮用於測量的基準 的藥物以及它們在生物基質中的代謝物 [5]，串聯質譜的高選擇性，具有 連續的質量的過濾，導致幾乎沒有或沒有觀察到 干擾，即使有可能相對高 濃度的coextracted和共洗脫基質組分的 存在。這些特點導致了越來越多 的是採用了小或高通量分析的趨勢 沒有樣品製備和最小的色譜 保留[6-8]。 用具有這些特性的HPLC-ESI-MS / MS 的高選擇性，靈敏度和吞吐量，但是並不 奇怪，這個技術被越來越多地使用 在臨床實驗室。通過杜利[9]最近的一篇評論 報導1991年至2001年在指數增長 提及串聯質譜臨床化學試卷 分析。它現在普遍認為HPLC-ESI-MS / MS 是選擇用於篩選遺傳性代謝的方法 紊亂[10]，但可以預見的是有更多的 應用程序將跟隨。雖然許多生化標誌物 如類固醇，脂肪酸，氨基酸，兒茶酚胺， 和甲狀腺素已經由該分析測量 技術[11-15]。臨床實驗室的具體例子 施加HPLC-ESI-MS / MS來定量藥物是 用於治療性藥物監測的免疫抑製劑 藥物[16]和蛋白酶抑製劑[17]，和毒理學 研究[18,19]。 雖然HPLC-ESI-MS / MS提供了很多承諾為 臨床實驗室，有一個問題必須在解決 方法開發，驗證和常規使用的是矩陣 的影響。基體效應的電離的改變 效率通過的共洗脫物質的存在。最近 由安涅斯雷[20]本文強調的重要性 在臨床質譜理解基質效應 應用，以及儘管到的成功至關重要 HPLC-ESI-MS / MS的分析方法，幾個公佈 的方法充分地解決這個問題[21]。的目標 這份報告提供的基體效應的概述，並 從臨床實驗室的角度展示了如何這個問題

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質譜（HPLC_MS）。疏水性使用 分離與選擇性質譜相結合 檢測使這是一個多功能的分析工具。電噴霧 是目前使用最廣泛的電電源。的 電噴介面單獨產生或乘以電荷 離子直接來自水性有機溶劑系統， 在 存在一個強大的電場，與熱的説明 或氣動。利用離子的成功形成 電噴霧電離需要兩個步驟：轉移 感興趣的化合物進入氣相和添加 如果麻醉劑尚未處於充電狀態，則向該毒劑收費 [1–4]. 使用電噴霧電源的HPLC_MS系統 結合串聯品質分析儀（HPLC_ESI_MS/MS） 已應用於各種研究 藥物分析和生命科學。與HPLC* ESI_MS/MS 現在被視為測量的基準 藥物及其代謝物在生物基質 [5]，串聯質譜的高選擇性，與 連續的品質過濾，導致很少或沒有觀察到 干擾，即使有可能相對較高 共提取和捲曲基質組分的濃度 目前。這些特徵導致 高通量分析的趨勢，其中很少或 無樣品製備和最小色譜 保留 [6][8]。 與HPLC_ESI_MS/MS具有這些特性 高選擇性、靈敏度和輸送量，它不是 令人驚訝的是，這項技術正日益被使用 在臨床實驗室。杜利最近的一篇評論 [9] 報告從1991年至2001年呈指數級增長。 臨床化學論文，提到串聯品質 譜。現在接受 HPLC_ESI_MS/MS 是遺傳代謝篩查的首選方法 紊亂[10]，但可以預期，更多的 應用程式將隨之而來。雖然許多生化標記 如類固醇，脂肪酸，氨基酸，兒茶酚胺， 和甲狀腺素已經測量這個分析 技術 [11[15]。臨床實驗室的具體實例 將HPLC_ESI_MS/MS應用於藥物定量 用於免疫抑制劑的治療藥物監測 藥物 [16] 和蛋白酶抑制劑 [17]，以及毒理學 調查[18，19]。 雖然HPLC_ESI_MS/MS為 臨床實驗室，一個問題，必須解決 方法開發、驗證和常規使用是矩陣 影響。矩陣效應是電電化的變化 效率由凝凝物質的存在。最近 安妮斯利的論文 [20] 強調了 瞭解臨床質譜中的基質效應 應用程式，雖然對 HPLC_ESI_MS/MS 分析方法，很少發佈 方法充分解決這個問題[21]。目的 本報告將概述矩陣效應和 從臨床實驗室的角度來看，這個問題是如何

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質譜法（高效液相色譜-質譜）。疏水劑的使用 分離與選擇性質譜聯用 檢測使其成為一種通用的分析工具。電噴霧 是現時應用最廣泛的電離源。這個 電噴霧介面產生單一或多重電荷 離子直接從水-有機溶劑系統 在 在熱的幫助下存在强電場 或者氣動。離子的成功形成 電噴霧電離需要兩個步驟： 氣相化合物和 如果分析物尚未處於帶電狀態，則對其充電 [1–4]。 使用電噴霧離子源的高效液相色譜-質譜系統 與串聯質譜儀（HPLC-ESI-MS/MS）聯用 已應用於 藥物分析和生命科學。使用高效液相色譜法- ESI–MS/MS現在被認為是量測的基準 生物基質中的藥物及其代謝產物 [5]，串聯質譜的高選擇性 連續的質量過濾，導致很少或根本沒有觀察到 即使干擾可能相對較高 共萃取和共稀釋基質成分的濃度 現在。這些特點導致 高通量分析的趨勢 無樣品製備和最小色譜 保持力[6–8]。 具有以下特徵的高效液相色譜-電噴霧-質譜/質譜 高選擇性、高靈敏度和高輸送量 令人驚訝的是這項科技正被越來越多的人使用 在臨床實驗室。杜利最近的評論[9] 一九九一年至二零零一年呈指數增長 臨床化學論文中提到串聯質量 光譜分析法。現在已經接受了HPLC–ESI–MS/MS 是篩查遺傳性代謝的首選方法 疾病[10]，但可以預料的是 隨後將提交申請。而許多生化標記 比如類固醇，脂肪酸，胺基酸，兒茶酚胺， 甲狀腺素的測定 科技[11-15]。臨床實驗室的具體例子 將HPLC-ESI-MS/MS應用於藥物定量是 免疫抑制劑的治療藥物監測 藥物[16]和蛋白酶抑制劑[17]，以及毒理學 調查[18,19]。 而HPLC-ESI-MS/MS為 臨床實驗室，一個必須解决的問題 方法開發、驗證和日常使用是矩陣 影響。基質效應是電離的改變 存在共溶物質時的效率。最近的 Annesley的論文[20]強調了 臨床質譜中基質效應的理解 應用程序，儘管對 HPLC-ESI-MS/MS分析方法，很少發表 方法充分解决了這個問題【21】。目的 本報告概述矩陣效應和 從臨床實驗室的角度看這個問題

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