Real-time PCR is the most popular r

Real-time PCR is the most popular rapid PCR detection method because the productscan be detected in situ while the reaction progresses, making post PCR processing unnec-essary. Real-time PCR methods make use of fluorescence detection with a built-in fluorimeter.Products can be detected in as little as seven minutes when real-time PCR detection iscombined with new PCR technologies that allow more rapid cycling of the reaction. Gene-specific fluorophore-labeled oligonucleotides such as Molecular Beacons, TaqMan® probes,Amplifluor®, and Scorpion® primers are used to measure fluorescence of the specific gene ofinterest as it is being amplified. Nonspecific detection methods can also be used that are basedon a DNA-binding fluorogenic molecule such as SYBR Green, which fluoresces brightly whenbound to double-stranded (ds)DNA. As the product increases in the vessel, so does the fluores-cence. The drawback is that these fluorogenic dyes bind to all dsDNA and thus nonspecificamplification products and primer-dimers may also be detected during amplification—obscuringthe results. Fluorescently labeled oligonucleotide probes and primers allow more specificdetection of products. There are a number of variations of the fluorescent oligonucleotidedetection techniques; for a review, see Mackay, Arden and Nitsche (2002). Variations of real-time PCR continue to be developed as users become more familiar with this rapid detectiontechnique. One variation uses a combination of both SYBR Green and sequence-specificoligonucleotide probes to acquire several layers of specificity. Real-time PCR is also amenableto multiplexing for more comprehensive identification of one organism or the detection ofmultiple species in one reaction. The main drawbacks of real-time PCR, as compared toconventional PCR, are the high start-up expense for equipment, the high cost of reagents,and the inability to determine the size or total number of amplicons, unless a post analysis ispreformed.

結果 (繁體中文) 1:

實時PCR是最流行的高速PCR的檢測方法，因為產品

可以在原位，同時將反應進行，使其交PCR處理unnec-來檢測
埃森。實時PCR方法使用熒光檢測與內置的熒光。

產品可以在短短七分鐘的時候，實時PCR檢測來檢測

新的PCR技術，使反應更快速循環相結合。基因-
特異性熒光團標記的寡核苷酸，例如分子信標，探針的TaqMan®，

Amplifluor®，和Scorpion®引物被用於測量的特定基因的熒光
，因為它是被放大的興趣。非特異性的檢測方法也可以使用基於
上的DNA結合熒光分子如的SYBR Green，其時發出熒光明亮

結合至雙鏈（DS）的DNA。由於該產品在血管增大，所以確實在fluores-
cence。其缺點是，結合至雙鏈DNA所有並因此這些非特異性熒光染料

的擴增產物和引物二聚體也可在擴增過程中，模糊地檢測
的結果。熒光標記寡核苷酸探針和引物允許更具體
的產品檢測。有許多的熒光寡核苷酸的變化的

檢測技術; 對於綜述，見麥凱，雅頓和Nitsche（2002）。現實的變化
實時PCR繼續發展為用戶帶來更為熟悉快速檢測

技術。一個變型中同時使用SYBR Green和序列特異性的結合
的寡核苷酸探針以獲取特異性的若干層。實時PCR是也適用
到复用為一個生物體的更全面的鑑定或檢測
多物種在一個反應。實時PCR的主要缺點，相比於
常規PCR，是用於設備的高啟動費用，試劑的成本高，
以及無法確定大小或擴增子的總數，除非後分析被
預製。

結果 (繁體中文) 2:

即時PCR是最流行的快速PCR檢測方法，因為產品

反應進行過程中，可原位檢測，使PCR後處理不發生。
埃沙裡。即時 PCR 方法使用內置螢光計的螢光檢測。

當即時 PCR 檢測時，只需 7 分鐘即可檢測到產品

結合新的PCR技術，使反應更快速迴圈。基因-
特定含氟量標記的寡核苷酸，如分子信標、TaqMan®探針、

ampliflu®和蠍子®引基用於測量
興趣，因為它被放大。也可以使用基於
在DNA結合的螢光分子，如SYBR綠色，螢光明亮時

綁定到雙鏈（ds）DNA。隨著產品在容器中增加，螢光
cence.缺點是這些含氟染料與所有dsDNA結合，因此非特異性

放大產物和引漆二聚器也可在擴增過程中檢測到
結果。螢光標記的寡核苷酸探頭和引物允許更具體
檢測產品。螢光寡核苷酸有許多變化

檢測技術;要查看，請參閱麥凱、阿登和尼采（2002年）。真實變化
時間 PCR 繼續開發，因為使用者越來越熟悉這種快速檢測

技術。一種變體同時使用 SYBR 綠色和特定于序列的組合
寡核苷酸探針獲得多層特異性。即時 PCR 也適合
進行多工，以便更全面地識別一個有機體或檢測
多個物種在一個反應。即時PCR的主要缺點，與
傳統的PCR，是設備啟動費用高、試劑成本高、
以及無法確定放大石的大小或總數，除非後分析是
預製。

結果 (繁體中文) 3:

實时PCR是最流行的快速PCR檢測方法，因為
反應進行時可原位檢測，使PCR後處理不確定-
埃薩裏。實时PCR方法利用內寘螢光計的螢光檢測。
當實时PCR檢測
結合新的PCR科技，使反應迴圈更迅速。基因-
特定的螢光標記寡核苷酸，如分子信標、TaqMan®探針，
Amplifulor®和Scorpion®引子用於量測
興趣被放大了。也可以使用基於
在DNA結合的螢光分子上，如SYBR綠色，當
與雙鏈DNA結合。當產品在容器中新增時，螢光也會新增-
衰老。缺點是這些螢光染料與所有的dsDNA結合，因而非特异性
擴增產物和引子二聚體也可在擴增遮蔽期間檢測到
結果。螢光標記的寡核苷酸探針和引子允許更特异的
產品檢測。螢光寡核苷酸有許多變異
檢測科技；回顧見Mackay、Arden和Nitsche（2002）。實變-
隨著用戶越來越熟悉這種快速檢測科技，時間PCR科技也在不斷發展
科技。一個變體同時使用SYBR Green和sequence specific
寡核苷酸探針獲得幾層特异性。實时PCR也是可行的
為了更全面地鑒定一種生物或檢測
一個反應中有多個物種。實时PCR的主要缺點，與
傳統的PCR，是設備的高啟動費用，試劑的高成本，
以及無法確定放大器的大小或總數，除非事後分析
預成型。