2.2.2 LARVAL ASSAYSH. iris and E. c

2.2.2 LARVAL ASSAYS
H. iris and E. chloroticus larvae were raised for 72 h in 300 ml FSW in glass jars placed in a flowing seawater bath to maintain a near constant temperature. Water temperature was 16°C ±1 in all E. chloroticus assays and 14°C ±1 in all H. iris assays. Embryos were placed in culture jars before 1st cell division, no more than 1 h after fertilisation. Embryo density was 30/ml for E. chloroticus (ASTM 2012) and 1/ml for H. iris (Anderson et al. 1994), and was confirmed to be suitable for these species in previous pilot experiments. All glassware was washed with hot water, soaked in 10% hydrochloric acid for a minimum of 4 h, rinsed and soaked in distilled water for 12 h, and rinsed in FSW before use. Two experiments were conducted: one with single metals (Cu, Zn and Pb) and one with combined metals (Cu + Zn, Cu + Pn and Zn + Pb). The single metal experiment had two runs for both species and the combined metal experiment a single run. Metal concentrations are shown in Table 2.1. They were based on a range-finding pilot trial, and the current experiments were designed to have one concentration producing no toxic effect, one producing close to 100% abnormal larvae, and two concentrations producing intermediate effects as required for accurate estimation of EC50s (US EPA 2002a). The concentration range was adjusted between the two runs of single metal tests on H. iris to add more intermediate effects and reduce EC50s confidence intervals. Each metal level and control had three replicates, plus an additional replicate jar in control conditions (FSW) and one in the highest metal level for each metal, in which to monitor pH and temperature.

結果 (中文) 1:

2.2.2 幼虫化验H.虹膜和 E.chloroticus 幼虫被提出为 72 h 在 300 毫升搅拌摩擦焊在玻璃罐放置在流动的海水浴保持近乎恒定的温度。水温度为 16 ° C ± 1 在所有 E.chloroticus 试剂和 14 ° C ± 1 在所有 H.虹膜检测条件。胚胎在受精后被放置在文化罐 1 次细胞分裂之前，不会超过 1 h。胚密度 30 毫升为 E.chloroticus (ASTM 2012) 和 1/毫升为 H.虹膜 （安德森 et al.1994年），并被证实为适合这些物种在以前的试点实验。所有的玻璃器皿是用热水洗净、 4 h 至少 10%盐酸溶液中浸泡、 冲洗和浸泡在蒸馏水中 12 小时，和在使用前搅拌摩擦焊在漂洗。两个实验 ︰ 一个与单金属 （铜、 锌、 铅），另一个与联合金属 （铜锌、 铜 Pn 和锌 + 铅)。单金属实验了两个物种和复合金属试验单次运行运行。金属浓度表 2.1 所示。他们基于测距试验，和当前的实验为了有一个浓度生产没有毒性的作用，一个接近 100%异常幼虫，生产和生产的两种浓度中间效果所需的准确估计的 EC50s (美国 EPA 2002a)。单金属测试 H.虹膜添加更多中间的影响，并减少 EC50s 置信区间这两次运行之间的浓度范围作了调整。每个金属水平和控制了三个复制，再加上额外复制在控制条件下 (FSW) 的罐子和一个在每种金属，在监测 ph 值和温度对金属的最高水平。

結果 (中文) 2:

2.2.2幼虫ASSAYS
H. 虹膜和大肠杆菌chloroticus幼虫饲养在300ml的FSW在玻璃罐72小时放置在流动的海水浴中以维持接近恒定的温度。水温为16℃±1中的所有E. chloroticus试验和14℃±1中的所有H.虹膜检测。胚胎置于培养罐之前第1细胞分裂，不超过受精后1小时。胚胎密度为E. chloroticus 30 /毫升（ASTM 2012）和1 /毫升H.虹膜（Anderson等人，1994），并确认是适合于在前面的导频实验这些物种。所有玻璃器皿洗涤用热水，浸泡在10％盐酸最少4小时，清洗，并在蒸馏水中浸泡12小时，并在使用前在FSW漂洗。两个实验：一个单一金属（铜，锌和铅）和一个结合金属（铜+锌，铜+的Pn和Zn + Pb）的。单金属实验有两个种类和组合的金属试验单次运行两分。金属浓度示于表2.1。它们是基于测距中间试验和电流实验设计成具有一种浓度不产生任何毒性作用，一是产生接近100％的异常幼虫，和两种浓度产生中间的效果所需的EC 50的准确估计（美国EPA 2002年a）。浓度范围为对H.虹膜单一的金属测试两个运行之间调整，以增加更多的中间作用，降低EC 50置信区间。各金属层和控制了三次重复，加在控制条件下（FSW）和一个在每个金属，其中监测pH和温度最高的金属级的附加 ​​复制罐子。

結果 (中文) 3:

2.2.2幼虫的检测H.虹膜E. chloroticus幼虫饲养72 h在300毫升搅拌摩擦焊在玻璃罐放在流动海水澡保持几乎恒定的温度。水的温度是16°C±1所有E. chloroticus检测14°C±1虹膜检测所有H.。胚胎被放置在培养瓶前第一的细胞分裂，不超过1小时后受精。胚密度为30 /毫升大肠chloroticus（ASTM 2012）和H.虹膜1 /毫升（Anderson等人。1994），并被证实是适用于这些物种在以前的试点实验。所有的玻璃器皿，用热水洗净，浸泡至少4小时10%盐酸，清洗和蒸馏水浸泡12 h，并在使用前冲洗搅拌摩擦焊。进行了2个实验：一个与单金属（铜，锌，铅）和一个合并的金属（铜+锌，铜+的光合速率和锌+铅）。单金属实验两个物种的运行，并结合金属实验一个单一的运行。金属浓度如表2.1所示。他们是基于测距试验，与目前的实验设计有一个浓度不产生毒性作用，生产近100%种浓度异常的幼虫，生产中间的影响对于准确估计所需的EC50s（US EPA 2002a）。浓度范围为调整两跑单金属试验之间H.虹膜增加中间的影响和降低EC50s置信区间。每个金属层和控制有三个，加上一个额外的复制罐子控制条件（FSW）和每种金属一金属水平最高，其中监测pH和温度。