4.2.4 SETTLEMENTDiet and Diet + Wat

4.2.4 SETTLEMENT
Diet and Diet + Water treatments and controls were placed in settlement containers after 26 days of larval development. Larvae in the Water treatment appeared to be delayed and were therefore given three additional days (29 d post-fertilisation) to achieve similar development as in the other treatments (i.e. > 50% of 8-armed plutei having a rudiment) before being transferred to the settlement containers. Details of the settlement procedure are described in section 3.2.4. Larvae were given eight days to settle, after which any remaining larvae were removed from the containers. Time post-settlement was counted from the first day larvae were placed in settlement containers, as many larvae settled within a day.
The total number of settlers per container was counted under a dissecting microscope(40x magnification) at 8 and 38 d post-settlement. All juveniles in each container were rated for normal development and were deemed as ‘abnormal’ when body shape was strongly irregular, or lacked spines or pigmentation (Table 3.3) when observed under a dissecting microscope (40x magnification). The first 20 settlers encountered were photographed under a dissecting microscope (25x magnification). Body diameter (radial length) and three spines were measured using the software ImageJ.
4.2.5 STATISTICS
All data analyses were conducted using the software R (version 3.1) with package multcomp (Hothorn et al. 2008) for pairwise comparisons and package nlme(Pinheiro et al. 2015) for mixed effects models.
4.2.5.1 Larval performance
Direct effects of copper treatments on larvae were evaluated by: (1) larval mortality rate; (2) larval normal development; (3) delayed development; (4) larval growth; and(5) larval size at the latest sampling.
Larval mortality rate was the difference in larval density divided by the initial number of larvae and time interval, to obtain the daily probability of mortality per capita early(from 4 to 15 or 16 d post-fertilisation) and late (from 15 or 16 to 23 or 24 d postfertilisation)in development. Normal larval development was the proportion of 6- and 8-armed pluteus larvae midway through development (i.e. 15 or 16 d postfertilisation)and the proportion of 8-armed pluteus larvae late in development (i.e. 23 or 24 d post-fertilisation). Mortality and normal development were analysed using repeated measures ANOVA with copper level and source of copper (Diet, Water or Diet + Water) as ‘between’ factors and larval stage (early, mid or late) as the ‘within’ factor. Both variables were square-root arcsin transformed.

結果 (中文) 1:

4.2.4 沉降饮食和饮食 + 水处理和控制被放置在解决集装箱经过 26 天的幼虫发育。幼虫在水处理中的似乎被延迟，因此给了三个额外天时间 （29 d 后受精） 在被转移到结算容器之前实现类似的发展，与其他治疗方法 （即 8 武装 plutei 有雏形的 > 50%)。第 3.2.4 条所述沉降过程的细节。幼虫有八天来解决后，任何剩余的幼虫从容器。后结算的时候，是从幼虫被安置在解决集装箱，尽可能多的幼虫定居在一天之内的第一天计算。每个集装箱的定居者总人数算是在解剖显微镜下 （放大 40 倍） 8、 38 d 后解决。每个容器中的所有少年被评为为正常发展和被视为 '不正常' 的身体形状时强烈不规则，或缺乏刺或色素沉着 (表 3.3) 时 （40 x 放大） 解剖显微镜下观察。在解剖显微镜下 （25 x 放大） 拍摄到了遇到的第一次 20 定居者。使用软件 ImageJ，测量身体直径 （径向长度） 和三个刺。4.2.5 统计用混合的效应模型的软件研发 （3.1 版） 与包 multcomp （Hothorn 等人，2008年） 成对比较和包 nlme （皮涅罗等人 2015年） 进行了所有的数据分析。4.2.5.1 幼虫性能测定了铜处理对幼虫的直接影响: (1) 幼虫的死亡率;（2） 幼虫的正常发育;（3） 延迟的发展;（4） 幼虫的生长;and(5) 在最新的取样幼虫的大小。幼虫的死亡率是幼虫密度除以幼虫的初始数量差异和时间间隔，以获得死亡率人均 （从 4 到 15 或 16 d 后受精) 早期和晚期的日常概率 （从 15 或 16 至 23 或者 24 d postfertilisation） 在发展中。正常的幼体发育是 6 和 8 武装长腕幼虫幼虫中途发展 (即 15 或 16 d postfertilisation) 以及 8 武装长腕幼虫幼虫晚在发展 （即 23 或 24 d 后受精） 的比例。使用重复的测量方差分析与铜水平和源铜 （饮食、 水或饮食 + 水） 正如 '' 因素与幼虫阶段 （早期、 中期或晚期） 作为 '内部' 因素分析死亡率和正常的发展。这两个变量是平方根 arcsin 转化。

結果 (中文) 2:

4.2.4沉降的
饮食和饮食+水处理和控件放置在容器结算后，幼虫发育26天。幼虫在水处理出现被延迟，因此，给予另外处理三天（29ð受精后）来实现类似的发展作为其他处理（即>具有雏形-8-武装plutei的50％）被转移到前结算容器。和解程序的细节在3.2.4节中描述。幼虫给予八天沉降，之后，任何剩余的幼虫从容器中除去。时间结算后从第一天的幼虫数分别置于结算的容器，因为很多的幼虫在一天之内解决。
每个集装箱移民总数在8和38Ð后结算解剖显微镜（放大40倍）下计数。在每个容器的所有少年被评为正常发育和被视为“异常”时，体形呈强不规则，或缺乏刺或当解剖显微镜（放大40倍）下观察色素沉着（见表3.3）。遇到的第一个20定居者解剖显微镜（放大倍数25倍）下拍摄。体直径（径向长度）和三个棘用软件ImageJ的测定。
4.2.5统计学
所有的数据分析使用的软件研发进行（3.1版本）与包multcomp（Hothorn等，2008），用于配对比较和包NLME（ 。皮涅罗等人2015）混合效应模型
4.2.5.1幼虫表现
对幼虫铜处理直接影响被评价：（1）幼虫死亡率; （2）幼虫发育正常; （3）发展滞后; （4）幼虫生长; 和（5）在最新的采样幼虫的大小。
幼虫死亡率在幼虫密度由幼虫和时间间隔的初始数量除以差，以获得人均早期（死亡率的每日概率从4至15或16天交-fertilisation），并在发展晚期（15或16至23或24ðpostfertilisation）。普通幼虫发育是通过发展（即15或16天postfertilisation）6,8武装幼虫长腕幼虫中途的比例和8个武装幼虫长腕幼虫的比例在开发的后期（即23或24ð受精后）。采用重复测量方差分析的“之间”的因素和幼虫阶段为“中”的因素（早期，中期或晚期），铜含量和铜源（饮食，水或饮食+水）死亡率和正常的发展进行了分析。这两个变量平方根反正弦转换。

結果 (中文) 3:

4.2.4沉降饮食和饮食+水处理和控制被放置在结算容器后26天的幼虫发育。在水处理的幼虫出现延迟，因此，额外的三天（29天受精后）来实现类似的发展作为其他治疗（如＞50% 8-armed plutei具有雏形）之前被转移到处理容器。和解的程序细节在第3.2.4描述。给予八天的时间，以解决任何剩余的幼虫被从容器中取出。从第一天的幼虫被放置在结算容器的时间内结算，因为许多幼虫在一天内解决。每个集装箱的移民总数在解剖显微镜下计数（40x放大）在8和38 d后沉降。在每个容器都被评为青少年的正常发展，被视为“异常”的时候，身体形态是强烈不规则，或缺乏刺或色素沉着（表3.3）在解剖显微镜下观察（40x放大）。第一20人遇到拍摄在解剖显微镜（25X放大）。体直径（径向长度）和三棘均使用软件ImageJ测量。4.2.5统计所有数据均使用R软件（3.1版本）进行包multcomp（hothorn等人。2008）成对比较和包nlme（Pinheiro等人。2015）混合效应模型。4.2.5.1作业幼虫的性能对铜处理对幼虫的直接影响：（1）幼虫死亡率；（2）幼虫正常发育；（3）发育迟缓；（4）幼虫生长；（5）幼虫大小。幼虫死亡率为幼虫密度除以幼虫和时间间隔的初始数量的差异，获得早期死亡率人均每日概率（从4到15或16天受精后）和晚期（从15或16至23或24天postfertilisation）发展。幼虫正常发育的6的比例，8-armed pluteus幼虫在发展（即15或16天postfertilisation）的比例和8-armed pluteus幼虫在开发后期（即23或24天受精后）。死亡率和正常发展进行了分析，采用重复测量的方差分析与铜的水平和来源的铜（饮食，水或饮食+水）为"之间的"因素和幼虫阶段（早，中或晚）为"内"因素。这两个变量的平方根反正弦变换。