2.4. Assay of proteases activityFir

2.4. Assay of proteases activity

Firstly, proteases solutions were prepared at the given concen-tration of 0.5 g/L for alcalase and neutrase, and 0.05 g/L for papain. Then part of proteases solution was treated under different ultra-sonic power and time. Then the activity of proteases before and after ultrasound was determined as follows: casein solutions (1.5%, w/v) as substrates for papain, alcalase and neutrase were prepared in sodium phosphate buffer (pH 7.2) and in lactic acid/-sodium lactate buffer (pH 3.0), respectively. In a reaction vial, 1 mL of the substrate and 1 mL of proteases solution were incu-bated at 37 LC for 10 min and then mixed. After reaction at 37 LC for 60 min, trichloroacetic acid (2 mL, 6.5%, w/v) was added to ter-minate the reaction, and then the mixture was centrifuged at 8000 rpm for 3 min at 4 LC. The supernatant (1 mL) was mixed with sodium carbonate (5 mL, 4%, w/v) and reacted with Folin–Cio-calteu reagent (1 mL, 20%, v/v) at 37 LC for 20 min. Absorbance of the mixture was determined at 660 nm. One unit of protease activ-ity was defined as 100 lg of tyrosine released equivalently by the enzyme [23].

結果 (中文) 1:

2.4.蛋白酶活性的测定首先，在给定浓度的碱性蛋白酶和中性蛋白酶，0.5 g/L 和 0.05 g/L 的木瓜蛋白酶制备了蛋白酶解。然后根据不同的超声波功率、 时间治疗蛋白酶解决方案的一部分。然后蛋白酶活性在前后超声确定如下︰ 酪蛋白解决方案 1.5%（w/v） 为木瓜蛋白酶、 碱性蛋白酶、 中性蛋白酶酶底物分别制备钠磷酸盐缓冲液 (pH 7.2) 和乳酸/钠乳酸缓冲 (pH 3.0)。在反应瓶，1 毫升的衬底和 1 毫升的蛋白酶解了威宝屏住 37 LC 10 分钟，然后把它们混合。37 在反应后 60 分钟，三氯乙酸 2ml，6.5%（w/v） LC 被添加到 ter 线性规划问题的反应，然后混合物 3 分钟 8000 rpm 离心在 4 LC。（1 毫升） 上清液，是掺碳酸钠 5 毫升，4%（w/v） 和与福林 — — Cio-calteu 试剂 1 毫升、 20%（v/v） 37 反应 20 分钟吸光度的混合物 LC 坚定的在 660 nm。一个单位的蛋白酶活动-ity 被定义为 100 lg 的酪氨酸酶 [23] 等效地释放。

結果 (中文) 2:

2.4。蛋白酶活性的测定

首先，蛋白酶以0.5克/升用于碱性蛋白酶和中性蛋白酶的给定concen-tration制备溶液，和0.05g / L的木瓜蛋白酶。随后的蛋白酶解决方案的一部分被不同的超声波功率和时间下处理。然后蛋白酶的活性前，测定超声如下之后：酪蛋白溶液（1.5％，重量/体积）作为用于木瓜蛋白酶，碱性蛋白酶底物和中性蛋白酶在磷酸钠缓冲液中制备（pH7.2）中，并在乳酸/钠的乳酸缓冲液（pH 3.0），分别。在一反应瓶中，1毫升基板和1mL的蛋白酶溶液分别INCU-屏息37的LC 10分钟，然后进行混合。在37的LC 60分钟，三氯乙酸反应（2毫升，6.5％，重量/体积）加入到后叔minate反应，然后将混合物在4 LC以8000rpm离心3分钟。上清液（1毫升）溶液用碳酸钠混合（5毫升，4％，重量/体积）中，用福林 - 10 - calteu试剂（1毫升，20％，V / V），在37的LC 20分钟进行反应。该混合物的吸光度在660nm测定。蛋白酶ACTIV-两者均一单位定义为酪氨酸100 LG通过酶[23]等效释放。

結果 (中文) 3:

2.4。蛋白酶活性测定首先，蛋白酶解制备在给定浓度0.5 g/L碱性蛋白酶和中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和0.05 g/L。然后在不同的超声功率和时间下对部分蛋白酶溶液进行处理。然后之前和之后，确定了超声遵循蛋白酶活性：酪蛋白溶液（1.5%，w / v）为底物的酶，在磷酸钠缓冲液制备碱性蛋白酶和中性蛋白酶（pH 7.2）和乳酸-乳酸钠缓冲液（pH 3），分别为。在反应瓶，1毫升的底物和蛋白酶溶液1 ml增加了37 LC 10 min，然后混合。37 LC反应60 min后，三氯乙酸（2毫升，6.5%，w/v）被添加到终止反应，然后混合液于8000 rpm离心3 min 4 LC。上清液（1毫升）混合碳酸钠（5毫升，4%，w/v）和Folin–CIO calteu试剂反应（1毫升，20%，v/v）37 LC 20分钟吸收的混合物在660 nm处测定。一个单位的蛋白酶活性被定义为100 LG发布等价的酪氨酸酶[ 23 ]。