Several future challenges must be a

Several future challenges must be addressed for DNA
enzymes that 3′-phosphorylate oligonucleotide substrates.
Such DNA enzymes may have the greatest practical utility for
3′-32P-radiolabeling, which for DNA is presently accomplished
using an α-32P-dNTP and terminal deoxytransferase (TdT), but
often with product heterogeneity because TdT can attach more
than one successive 32P-nucleotide to the 3′-terminus. A DNA
enzyme for 3′-32P-radiolabeling would preferably use commercially
available γ-32P-ATP or GTP as the phosphoryl donor with
low Km value, rather than the pppRNA required by 3′Kin1. Our
ongoing efforts toward deoxyribozymes for peptide side chain
phosphorylation support the expectation that such reactivity
with a small-molecule phosphoryl donor such as ATP or GTP
should be achievable.32,33 3′-Phosphorylation of RNA rather
than DNA is also a valuable objective. For all of these
applications, the most general substrate sequence scope is
desired, either from an individual DNA enzyme or collectively
from a set of DNA enzymes. Such generality has been achieved
with RNA-cleaving deoxyribozymes49−51 and RNA ligase
deoxyribozymes52,53 and seems likely for DNA-hydrolyzing
deoxyribozymes as well,45,54 suggesting the viability of general
DNA-catalyzed oligonucleotide 3′-phosphorylation.

結果 (繁體中文) 1:

幾個未來的挑戰，必須得到 dna酶，3 ′-能磷酸化寡核苷酸基板。這種 DNA 酶可能有的最大實際實用程式3 ′-(32) P-本文研究，為 DNA 目前完成使用 α-32 P-dNTP 和終端 deoxytransferase (TdT)，但經常與產品異質性因為 TdT 可以附加更多比一個連續 (32) P-核苷酸 3 ′ 總站。DNA3 ′ 32 P 研究酶最好是將商業使用可用的 γ-(32) P-ATP 或 GTP 作為與磷醯基供體低的 Km 值，而不是所需的 3′Kin1 pppRNA。我們去氧核酶肽側鏈不斷努力磷酸化支援的期望，這種反應性與小分子醯捐助如 ATP 或 GTP而是應該 achievable.32,33 3 ′-磷酸化的 RNADNA 比也是一個有價值的目標。對於所有這些應用程式，最一般的基板序列範圍是需要，從個人的 DNA 酶或集體從一套 DNA 酶。取得了這種一般性與 RNA 裂解 deoxyribozymes49−51 和 RNA 連接酶deoxyribozymes52，53，似乎可能為 DNA 水解去氧核酶，以及 45，54 暗示一般的可行性催化 DNA 寡核苷酸 3 ′-磷酸化。

結果 (繁體中文) 2:

未來的若干挑戰，必須進行DNA加以解決
酶是3'-磷酸化的寡核苷酸底物。
這樣的DNA的酶可具有為最大的實際效用
3'-32P-放射性標記，其用於DNA目前完成
使用α-32P-的dNTP和終端deoxytransferase酶（TdT），但
通常與產品的異質性，因為轉移酶可以附加更
多個連續32P核苷酸到3'末端。的DNA
的3'-32P放射性標記酶將最好使用商業上
可用的γ-32P-ATP或GTP作為與磷施主
低Km值，而不是要求3'Kin1的pppRNA。我們的
朝向脫氧肽側鏈正在進行的努力
磷酸支持期望這樣的反應性
的小分子的磷施主如ATP或GTP的
應該是RNA的achievable.32,33 3'-磷酸化，而
不是DNA也是有價值的目標。對於所有這些的
應用中，最一般的底物序列範圍
所需的，無論是從一個個體的DNA酶或共同
從一組DNA的酶。這種一般性已經實現
與RNA切割deoxyribozymes49-51和RNA連接酶
deoxyribozymes52,53和DNA的水解似乎有可能
脫氧還有，45,54這表明一般的可行性
DNA催化寡核苷酸3'磷酸化。

結果 (繁體中文) 3:

未來的一些挑戰，必須解决的DNA3′-磷酸寡核苷酸底物的酶。這種DNA酶可能有最大的實用價值3′32P標記DNA，這是現時完成的使用α32P dNTP和終端deoxytransferase（TDT），但常常因為TDT能重視產品的異質性不是一個連續的32p核苷酸3′端。DNA3′酶32P的放射性標記最好使用商業可γ-γ-~P-ATP或GTP作為磷酸供體與低Km值，而不是3′Kin1要求ppprna。我們的對肽側鏈的脫氧核酶的持續努力磷酸化支持這樣的反應性的期望用小分子如ATP或GTP磷酸供體應該是可以實現的。作為3′磷酸化RNA而比DNA也是一個有價值的目標。所有這些應用程序中，最一般的基片序列範圍是所需的，無論是從一個單獨的DNA酶或集體從一組DNA酶。這樣的一般性已經實現具有RNA切割deoxyribozymes49−51和RNA連接酶deoxyribozymes52,53和可能的DNA水解脫氧核酶為好，45,54提示一般的活力DNA催化的寡核苷酸3磷酸化。