Cells were fixed in 2% paraformalde

Cells were fixed in 2% paraformaldehyde for 20 min and permeabilized in 0.5% Triton X-100 in PBS for 10 min. The lung adenocarcinoma tissues were dipped into O.C.T. compound (Tissue-Tek), frozen. OCT-embedded tissues were sectioned (6 μM) and placed on glass slides. The sections were fixed with 4% paraformaldehyde for 20 minutes. Slides were incubated with the primary antibody for 60 min. The following antibodies were used: YB-1 (Rabbit, Abcam, ab106579), MACC1 (Mouse, Sigma, AMAB90832) and Ki67 (Mouse, CST, 9449). Immune complexes were stained with the secondary antibody conjugated to Alexa-488 or Alexa-546 (Invitrogen). Nuclei were stained with DAPI (Sigma). Each experimental group contained 6 wells each time, five fields of each well were imaged.

結果 (繁體中文) 1:

細胞固定在2％多聚甲醛20分鐘，並在0.5％的Triton X-100透化在PBS中持續10分鐘。在肺腺癌組織浸入OCT化合物（組織-Tek公司），冷凍。OCT包埋的組織切片（6μM），並放置在載玻片上。將切片用4％多聚甲醛處理20分鐘。載玻片用60分鐘的第一抗體孵育。將使用下列抗體：YB-1（兔，Abcam公司，ab106579），MACC1（小鼠，Sigma公司，AMAB90832）和Ki67（鼠標，CST，9449）。免疫複合物用結合Alexa-488或Alexa-546（Invitrogen）的第二抗體染色。細胞核用DAPI（Sigma公司）染色。每個實驗組含有每次6個孔，每個孔的五個字段進行成像。

結果 (繁體中文) 2:

細胞在2%的甲醛中固定20分鐘，在PBS中滲透0.5%Triton X-10010分鐘。肺腺癌組織被浸入O.C.T.化合物（組織-泰克），冷凍。OCT嵌入式組織被分割（6 μM），並放置在玻璃幻燈片上。用4%的甲醛固定20分鐘。用原抗體孵育幻燈片60分鐘。使用了以下抗體：YB-1（兔子，Abcam，ab106579），MACC1（小鼠，西格瑪，AMAB90832）和Ki67（小鼠，科技委，9449）。免疫複合物與與Alexa-488或Alexa-546（Invitrogen）結合的二級抗體染色。核被DAPI（西格瑪）弄髒了。每個實驗組每次包含6口井，每口井有5個場被成像。

結果 (繁體中文) 3:

細胞在2%多聚甲醛中固定20分鐘，在0.5%Triton X-100中滲透10分鐘，將肺腺癌組織浸入O.C.T.複合物（組織Tek）中冷凍。OCT包埋組織切片（6μM）置於玻片上。切片用4%多聚甲醛固定20分鐘。載玻片與主要抗體孵育60分鐘。使用以下抗體：YB-1（兔，Abcam，ab106579）、MACC1（小鼠，Sigma，AMAB90832）和Ki67（小鼠，CST，9449）。免疫複合物用與Alexa-488或Alexa-546（Invitrogen）結合的二級抗體染色。用DAPI（Sigma）染色細胞核。實驗組每次6口井，每口井成像5個場。