所有化合物首先在培養的HepG2.2.15細胞上測試了體外細胞毒性作用(如果有的話)。細胞在96孔平底培養板(Becton-Dickinson Labware)中播種(0.5105威爾,三聯),並在夜間生長。化合物首先溶解在50ll的二甲基亞硫酸鹽(DMSO)後續在培養介質的最終製備(1毫克/毫升)。通過在培養介質中稀釋,進一步製備每種化合物的5劑(2.5、5、10、20和50lg/ml)。使用的DMSO的最終濃度從未超過±0.1%,因此沒有細胞毒性。具有0.1%DMSO的RPMI作為未經處理或負控制。這些藥用含有藥物劑量的介質補充,然後根據製造商手冊孵育48小時,然後進行MTT測定(TACS MTT細胞親生命測定試劑盒,特雷維根)。所有化合物的50%細胞毒性濃度(CC50)均使用Excel軟體中的回歸曲線確定。重複進行切除,以確認可重複性。 ...
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