We used Lipofectamine2000 (Invitrog

We used Lipofectamine2000 (Invitrogen) as the media to transfer the plasmids into OEG. Transfection procedure was performed according to the instructions of manufacturer. Briefly, one day before transfection, cells were plated in growth medium (without antibiotics) in a 24-well plate so that they would be 90%-95% confluent at the time of transfection. Dilute plasmid in 50μL of Opti-MEM I Reduced Serum Medium without serum and mix gently. MixLipofectamine2000 gently before use, then dilute the appropriate amount in 50μL of Opti-MEM I Medium. Mix gently and incubate for 5 min at room temperature. After the 5-min incubation, combine the diluted DNA with the diluted Lipofectamine2000. Mix gently and incubate for 20 min at room temperature to allow the formation of plasmid-Lipofectamine2000 complexes. Add the complexes to each well. Mix gently by rocking the plate back and forth. Incubate the cells at 37oC in a CO2 incubator for 24-48h until they were ready to assay for transgene expression.

結果 (中文) 1:

我们用 Lipofectamine2000 (Invitrogen) 作为媒体转移到 OEG 的质粒。按照制造商的说明进行了基因转染的过程。简单地说，基因转染前, 一天的单元格被镀金的生长介质 （无抗生素) 在 24 孔板这样，他们会在转染时 90%-95%合流。稀质粒在 50 μ l 感受的 Opti MEM 我降低血清培养基无血清和轻轻混匀。轻轻地在使用之前，MixLipofectamine2000 然后稀适当数额在 50 μ l 感受的 Opti MEM I 介质。轻轻地混合和孵育 5 分钟在室温。5 分钟孵化后结合稀释的 DNA，用稀释 Lipofectamine2000。轻轻地混合和孵育 20 分钟在室温允许质粒 Lipofectamine2000 配合物的形成。将配合物添加到每个井。由摇床来回轻轻混匀。直到他们准备法的转基因表达孵育 37oc 在 24-48 h 为 CO2 孵化器中的单元格。

結果 (中文) 2:

我们使用Lipofectamine2000（Invitrogen）中，以质粒转移到OEG介质。转染过程是根据制造商的说明书进行。简言之，转染前一天，将细胞接种在生长培养基中（不含抗生素），在24孔板中，使它们将是90％-95％汇合的转染时。稀释质粒的Opti-MEM的50μL我低血清培养基无血清，轻轻混匀。MixLipofectamine2000轻轻在使用前，然后在稀释的Opti-MEM I培养基50μL各适量。轻轻混匀，静置5分钟，在室温下。在5分钟的孵育后，结合与稀释的Lipofectamine2000稀释的DNA。轻轻混匀，并孵育20分钟，在室温下，以允许质粒Lipofectamine2000复合物的形成。添加的配合物至每孔。通过摇动板来回轻轻混匀。孵育的细胞在37℃的CO2培养箱中培养24〜48小时，直到他们准备测定的转基因表达。

結果 (中文) 3:

我们用脂质体（Invitrogen公司）为载体转染OEG。转染程序是根据制造商的指示进行。简要，转染前一天，将细胞接种于培养基（不含抗生素）在24孔板中，这样他们会有90%—95%汇合在转染时间。稀50μL在MEM质粒我降低血清无血清培养基中，轻轻拌匀。mixlipofectamine2000轻轻地使用前，然后稀释至适当的数量在50μL在MEM中的我。轻轻地混合，在室温下孵育5分钟。5分钟的孵育后，稀释后的DNA与脂质体结合稀释。轻轻地混合，在室温下孵育20分钟，让plasmid-lipofectamine2000复合物的形成。添加复合物在每。轻轻混合板来回摇动。培养细胞在24-48小时在二氧化碳培养箱37oC直到他们准备为转基因表达检测。