To verify the specificity of the pr

To verify the specificity of the primers, a large selection of nontarget cells were tested by mPCR. A 1 mL of pure culture was centrifuged at 12,000 g for 5 min and the pelletwas resuspended in an equal volumeof sterilewater.DNAtemplateswere obtained using the boiling method in which the samples were boiled for 15 min to release the genomic DNA, and followed by centrifugation at 12,000 g for 5 min. The genomicDNAs in the supernatantwas used as template DNAs for mPCR assays immediately. To test the limit of detection (LOD) of the PMA-mPCR assay, 10-fold serially diluted viable bacterial cell suspensions ranging from 107 to 101 CFU/Ml were subjected to PMA treatment and DNA extraction as mentioned above, followed by the mPCR assay. Additionally, to determine whether the PMA treatment would affect the LOD, non-PMA treated and negative control samples were subjected to the mPCR assay.

結果 (繁體中文) 1:

要驗證的特異性引物，通過反應檢測的靶細胞大的選擇。1 毫升的純培養被離心 5 分鐘和再懸浮在同等音量 sterilewater pelletwas 12,000 g。DNAtemplateswere 使用樣品被煮 15 分鐘釋放基因組 DNA，和緊接著在 5 分鐘的 12,000 g 離心煮沸法獲得。在立即反應測定，作為範本 Dna 用於 supernatantwas genomicDNAs。要測試的 PMA 反應測定，檢測 (LOD) 極限 10 倍連續稀釋活細菌細胞懸浮液從 107 到 101 CFU/Ml 受到 PMA 待遇和 DNA 提取如上所述，其次是反應測定。此外，若要確定是否 PMA 治療會影響 LOD，非 PMA 治療和陰性對照樣本受到反應測定。

結果 (繁體中文) 2:

要驗證的引物的特異性，一個大的選擇非靶細胞通過多重PCR檢測。A 1毫升純培養物以12,000×g離心5分鐘，並再懸浮於等volumeof使用其中將樣品煮沸15分鐘，以釋放的基因組DNA，並然後離心在沸點方法sterilewater.DNAtemplateswere得到的pelletwas 12000克5分鐘。在用作用於多重PCR模板的DNA的supernatantwas的genomicDNAs立即測定。為了測試PMA-多重PCR測定法的檢測限（LOD）的限制，10倍系列稀釋的活菌懸浮液從107至101個/毫升經受PMA處理並如上所述提取DNA，接著是多重PCR測定。此外，為了確定對PMA治療是否會影響到LOD，非PMA處理和陰性對照樣品進行了多重PCR分析。

結果 (繁體中文) 3:

為了驗證引子的特异性，大量選用非靶細胞進行檢測。一個1毫升的純培養，離心12000克為5 min，沉澱懸浮於等體積sterilewater.dnatemplateswere使用煮沸法，樣品煮沸15分鐘釋放基因組DNA的獲得，其次是在12000 g離心5 min genomicdnas在共同作為多重PCR檢測範本DNAs立即。測試的檢測限（LOD）的PMA MPCR，10倍稀釋後活菌細胞懸浮液從107到101 CFU /毫升進行PMA處理和DNA選取如上所述，其次是MPCR。此外，以確定PMA處理會影響LOD，非PMA和陰性對照樣品進行檢測分析。