Gene expression of mammary tissue w

Gene expression of mammary tissue was performed by extracting RNA with a PureLink RNA Mini Kit (Life Technologies, Carlsbad, CA), and subsequent cDNA synthesis was conducted by RT, where the total RNA (1.0 μg) was reverse-transcribed in a final volume of 20 μL employing the Improm II kit (Promega, Madison, WI). In summary, the protocol began with the incubation of RNA with 0.5 μg oligo-dT for 5 min at 70°C. Then, 1× buffer, 3.0 mM MgCl2, 0.5 mM dNTP, 40 units of RNase inhibitor, and 1.0 μL of Improm reverse transcriptase were added to the reaction tube. The reaction was conducted at 42°C for 60 min, followed by 15 min cooling at 70 and 4°C. Then, the samples were subjected to RT and subsequent analysis of the amplified gene fragments. The expression of the target genes was determined by RT-PCR using the primers described in Table 1.

結果 (繁體中文) 1:

通過用的PureLink RNA Mini試劑盒（Life Technologies公司，卡爾斯巴德，CA），和隨後的cDNA合成中提取的RNA進行乳腺組織的基因表達通過RT，其中總RNA（1.0微克）逆轉錄在終體積進行20μL採用Improm II試劑盒（Promega，麥迪遜，WI）。總之，該協議開始與RNA的在70℃下溫育用0.5μg寡-dT 5分鐘。然後，1×緩衝液，3.0mM的氯化鎂，0.5mM的的dNTP，RNA酶抑製劑的40個單位，和1.0 Improm的μL逆轉錄酶加入到反應管中。將反應物在42進行℃下進行60分鐘，接著15分鐘，在70和4℃下冷卻。然後，將樣品進行RT和擴增的基因片段的隨後的分析。靶基因的表達通過RT-PCR，使用表1中所述的引物來確定。

結果 (繁體中文) 2:

Bagus Sonder ongkos

結果 (繁體中文) 3:

乳腺組織的基因表達是通過使用PureLink RNA小型試劑盒（Life Technologies，Carlsbad，CA）選取RNA來完成的，隨後的cDNA合成是通過RT進行的，其中總RNA（1.0μg）使用Improm II試劑盒（Promega，Madison，WI）在20μL的最終體積中反向轉錄。綜上所述，該方案首先在70℃下用0.5μg寡糖dT孵育RNA 5分鐘，然後在反應管中加入1×緩衝液、3.0 mM MgCl2、0.5 mM dNTP、40組織RNase抑制劑和1.0μL Improm逆轉錄酶。將反應在42℃下進行60分鐘，然後在70℃和4℃下冷卻15分鐘。然後，對樣品進行RT並隨後對擴增的基因片段進行分析。利用錶1所述的引子，通過RT-PCR測定靶基因的表達。