In this study, we have explored the

In this study, we have explored the role of the neck linker in kinesin stepping and gating by engineering kinesin constructs with extended neck linkers designed to decrease mechanical tension between the motor domains (Hackney et al., 2003). These “extended” kinesins remain processive, but show a “gating” defect, reflected in a decrease in motor velocity due to impaired coupling of ATPase turnover to forward stepping. However, the velocity of movement can be increased by chemically crosslinking the neck linkers to partially restore intramolecular tension or applying external tension on the motor with an optical trap. We also show that external tension can initiate the stepping of a kinesin motor that lacks its mechanical element (the neck linker), as well as wild-type kinesin that lacks a chemical energy source (ATP). These results suggest that the dissociation of the rear kinesin head, promoted by tension from either neck linker docking in the front head or force produced by an optical trap, constitutes a “gate” that must open for kinesin to initiate its 8 nm step.

結果 (中文) 1:

在这项研究中，我们已经探讨颈部连接器的作用驱动蛋白步进和门工程动蛋白的结构与颈部扩展连接器设计，减少机械电机领域（哈克尼等，2003年）之间的紧张关系。这些“扩展”动蛋白的processive，但呈现出“门控”的缺陷，反映由于受损的ATP酶耦合营业额转发步进电机速度减少。然而，增加的移动速度可以通过化学交联的颈部连接子分子内的张力或施加外部电机上的张力与光阱部分恢复。我们还将显示，外部张力的的动蛋白电机缺少的机械元件（颈部链接器），以及缺乏一种化学物质的能量源（ATP）的野生型驱动蛋白启动步进。的后动蛋白头的解离，这些结果表明，从任一颈链接器对接在前面的头或光阱力推动的张力，构成一个“门”，必须打开驱动蛋白启动8纳米步骤。

結果 (中文) 2:

在这项研究中，我们探索的作用，颈部连接的驱动蛋白步和门控驱动蛋白与颈部连接子工程扩展设计降低电机域之间的机械张力（Hackney等人。，2003）。这些“扩展”驱动蛋白保持性，但显示“门控”缺陷，反映在电机速度由于ATP酶的营业额减少了步进式耦合受损。然而，运动的速度可以增加，通过化学交联的颈部连接部分恢复的分子内张力或施加外部张力对光阱电机。我们还表明，外部张力可以启动步进电机动蛋白缺乏的机械元件（颈部链接器），以及野生型蛋白缺乏化学能源（ATP）。这些结果表明，驱动蛋白头部后方的解离，无论从颈连接在前面的头或力光阱产生张力促进对接，构成一个“门”，必须打开驱动蛋白发起8 nm的步骤。

結果 (中文) 3:

在此研究中，我们探讨了脖子中驱动蛋白步进和浇注的工程驱动蛋白构造与扩展的脖子连接器旨在减少机械张力电机域 （哈克尼等人，2003年） 之间的链接器的作用。这些"扩展"的驱动蛋白仍诉求，但显示一个"开关"的缺陷，反映在由于受损耦合的 ATPase 营业额转发步进电机速度下降。然而，运动的速度可以增加了化学交联脖子连接器，部分恢复分子内紧张或外部张力马达应用光学的陷阱。我们还显示外部张力可以启动的缺乏 （颈部链接器），其机械元素驱动蛋白电机步进，以及缺乏化学能量源 (ATP) 的野生型驱动蛋白。这些结果表明的离解的后方驱动蛋白头，促进由紧张从停靠在前面头或力产生的光的陷阱，要么颈部链接器构成必须为驱动蛋白启动其 8 毫微米一步打开"门"。