Plasmid Constructs—A 3.3-kb human P

Plasmid Constructs—A 3.3-kb human PKD1 promoter fragment (3,346 to 33) in the promoterless luciferase reporter
vector pGL3-Basic (Promega) was originally generated in our
lab (14). Promoter deletion constructs (1.3 kb, 2.0 kb, 1.7 kb,
1.0 kb, and 200 bp) cloned in pGL2-Basic and/or pGL3-Basic
were previously described (14–16). The mammalian expression construct for the activated CA-Mekk1 (pFC-MEKK) was
from Stratagene. This construct represents the C-terminal
end (293 amino acids) of full-length (1,493 amino acids)
Mekk1 (23). p53 and dominant-negative p53 mutant were
generous gifts of Dr. Samir El-Dahr (Tulane University Health
Sciences Center). HCT116 p53/ cells were a gift from the
Vogelstein lab (The Johns Hopkins University).

結果 (中文) 1:

质粒的构建 — — 3.3 kb 人类 PKD1 启动子片段 （3,346 到 33） 在无荧光素酶记者矢量 pGL3-基本 （麦格） 最初产生我们实验室 （14）。启动子删除构造 （1.3 kb，2.0 kb，1.7 kb1.0 kb 和 200 bp） 在 pGL2 基本和/或 pGL3 基本克隆前面介绍了 （14-16）。哺乳动物的表达式构造，它用于激活 CA Mekk1 （pFC 供应） 是从 Stratagene。这种构造表示 C 终端全长 （1,493 氨基酸） 结束 （293 氨基酸）Mekk1 (23)。p53 蛋白和显性负 p53 突变体慷慨的礼物的博士萨米尔 · 埃尔-代赫尔 （美国杜兰大学健康科学中心）。HCT116 p53 / 细胞是从礼物Vogelstein 实验室 (约翰霍普金斯大学)。

結果 (中文) 3:

质粒constructs-a 3.3-kb的人PKD1启动子片段（ 3346  33）在无启动子荧光素酶
载体pGL3-Basic（Promega）最初是在我们
实验室产生的（14）。启动子缺失构建（1.3 kb，2 kb，1.7 kb，1 kb和200 bp
，PGI2）在基础和/或pGL3-Basic
先前描述的克隆（14–16）。为激活ca-mekk1哺乳动物表达构建体（PFC MEKK）是从Stratagene
。这种结构表示的C-末端
端（293个氨基酸）的全长（1493氨基酸）
MEKK1（23）。p53和显性负突变是
慷慨的馈赠博士萨米尔埃尔达尔（杜兰大学健康科学中心
）。HCT116细胞p53  / 从
礼物Vogelstein实验室（约翰霍普金斯大学）。