3.4. A pharmacological Nrf2 activat

3.4. A pharmacological Nrf2 activator, BARD, elevates Smad7 andsuppresses TGF-β signalingSynthetic triterpenoid BARD is known to have antioxidant effects with potent Nrf2 inducing activity [47]. In MES-13 cells, we tested whether this pharmacological Nrf2 activator could affect Smad7/TGF-β signaling. First, we confirmed BARD-mediated Nrf2 activation in MES13 cells. Protein levels of Nrf2 were increased at each dose of BARD treatment (0.025, 0.05, and 0.1 μM for 24 h) (Fig. 4A). In addition, ARE activity increased by 4-fold following BARD incubation (0.1 μM for 24 h) without any significant cytotoxicity (Fig. 4B). As shown in Fig. 4C, levels of Smad7 was increased by treatment with BARD (0.1 μM), which is accompanied by the increase in the expression of Nrf2 and its target Nqo1, Ho-1, and Gclc proteins (Fig. 4C). In addition, the levels of Smurf1 and TβRI were significantly decreased by BARD treatment, similar to the result from the genetic activation model of Nrf2 (Fig. 4D). Likewise, we confirmed that the elevation of p-Smad2/p-Smad3 and fibrotic markers (fibronectin and α-Sma) by TGF-β was blocked by BARD treatment (Fig. 4E). Whereas, Smad7 level that was elevated by TGF-β1 incubation was not altered by BARD treatment. These results showed that a pharmacological Nrf2 activator, BARD, similar to genetic Nrf2 activation, suppressed TGF-β-mediated fibrotic signaling through Smad7 elevation in mesangial cells.

結果 (繁體中文) 1:

3.4。藥理學Nrf2激活劑，BARD，Smad7的升高和
抑制TGF-β信號傳導
合成三萜類BARD已知具有強效的Nrf2誘導活性[47]抗氧化作用。在MES-13細胞，我們測試的藥理和Nrf2激活是否會影響Smad7的/ TGF-β信號。首先，我們證實BARD介導的Nrf2激活MES13細胞。Nrf2的蛋白表達水平在治療BARD（0.025，0.05和0.1μM24小時）（圖4A）的每個劑量增加。此外，現在的活動增加了4倍以下BARD育（0.1μM24小時）而沒有任何顯著的細胞毒性（圖4B）。如圖4C所示，Smad7的水平增加了治療BARD（0.1μM），這伴隨著通過在Nrf2的和它的靶NQO1，HO-1的表達的增加，和GCLC蛋白（圖4C）。此外，Smurf1和TβRI水平由BARD治療均顯著下降，類似於從Nrf2的（圖4D）的遺傳激活模型的結果。同樣，我們證實，P-Smad2的苯乙烯/對 - Smad3蛋白和纖維化標記物（纖連蛋白和α-SMA）的由TGF-β仰角被阻斷BARD處理（圖4E）。然而，這是由TGF-β1孵化升高Smad7的水平不是由BARD治療改變。這些結果表明，藥理學Nrf2激活，BARD，類似於遺傳Nrf2的活化，抑制TGF-β介導的纖維變性信令通過在腎小球系膜細胞Smad7的高程。

結果 (繁體中文) 2:

3.4. 藥理學 Nrf2 活化劑，BARD，提升 Smad7 和
抑制TGF-+信令
合成三苯酮類BARD已知具有抗氧化作用與強大的Nrf2誘導活性[47]。在MES-13細胞中，我們測試了這種藥理學Nrf2活化劑是否會影響Smad7/TGF-+信號。首先，我們確認在MES13細胞中由BARD介導的Nrf2啟動。每劑BARD治療中Nrf2的蛋白質水準增加（0.025，0.05，24小時0.1μM）（圖4A）。此外，在BARD孵育（0.1 μM，24小時）後，ARE活性增加了4倍（不含任何明顯的細胞毒性（圖4B）。如圖4C所示，通過使用BARD（0.1 μM）治療，Smad7的含量增加，同時Nrf2及其目標Nqo1、Ho-1和Gclc蛋白的表達增加（圖4C）。此外，通過BARD治療，藍精靈1和T_RI的含量顯著降低，類似于Nrf2基因啟動模型的結果（圖4D）。同樣，我們確認TGF-α的p-Smad2/p-Smad3和纖維化標記物（纖維蛋白和β-Sma）的升高被BARD治療阻斷（圖4E）。然而，由TGF-+1孵育升高的Smad7水準並沒有通過BARD治療而改變。這些結果表明，一種藥理學Nrf2活化劑，BARD，類似于遺傳Nrf2活化，通過介體細胞中的Smad7升高抑制TGF-β介導纖維化信號。

結果 (繁體中文) 3:

3.4條。一種藥理學的Nrf2啟動劑，BARD，升高Smad7和
抑制TGF-β信號傳導
合成的三萜巴德已知具有抗氧化作用，具有强大的Nrf2誘導活性[47]。在MES-13細胞中，我們檢測了這種藥理性Nrf2啟動劑是否能影響Smad7/TGF-β信號傳導。首先，我們在MES13細胞中證實了BARD介導的Nrf2啟動。Nrf2蛋白水准在每一劑量的BARD處理（0.025，0.05，和0.1μM持續24小時）時新增（圖4A）。此外，在巴德培養（0.1μM培養24小時）後，活性新增了4倍，沒有任何明顯的細胞毒性（圖4B）。如圖4C所示，用BARD（0.1μM）處理後Smad7的水准新增，同時Nrf2及其靶蛋白Nqo1、Ho-1和Gclc的表達新增（圖4C）。此外，BARD處理顯著降低了藍精靈1和TβRI的水准，與Nrf2的遺傳啟動模型的結果相似（圖4D）。同樣地，我們證實，經BARD治療後TGF-β阻斷了p-Smad2/p-Smad3和纖維化標誌物（纖維連接蛋白和α-Sma）的升高（圖4E）。而經TGF-β1孵育升高的Smad7水准經BARD處理後無明顯改變。這些結果表明，與基因Nrf2啟動類似的藥理學Nrf2啟動劑BARD通過上調系膜細胞Smad7抑制TGF-β介導的纖維化訊號。