Owing the characteristics of quasispecies, natural isolate FMD viruses derived from different outbreaks showed much antigenic difference, which generally results in vaccine lacking effective protection against those FMD epidemic strains and even causing FMD outbreak. It is, therefore, an essential part of the epidemiological survey to assess regularly the antigenic characteristics of field isolates. Continuous monitoring of the antigenic relationship of field isolates in relation to the reference vaccine strain will provide an up to date knowledge about the efficacy of the vaccine virus in use and also has access to select the most suitable vaccine strains in case of emergency vaccination. Antigenic profiling by ELISA using panels of well-characterised MAbs [26] is suitable approaches for selecting representative virus isolates for vaccine matching. ELISA also has been used as a rapid method for assessing the relationship of vaccine virus strains with field virus strains collected [27] or those from outbreaks and subsequently, the liquid phase blocking (LPB) ELISA has been in use as an alternative to serum neutralization test (SNT) in determining the protective antibody response [28,29] and assessing the antigenic relationship of field viruses [30,31]. The result obtained in ELISA test was more appropriate towards incorporation of O1/Manisa into the vaccination program [31]. And the use of multiple Mabs has the advantage that it is less likely that a field virus will fail to possess at least one of the epitopes recognised by the antibodies. Antibodies that neutralize viral infectivity provide an important mechanism of protection against FMD. Thus, it is important to define epitopes, especially those ones that elicit the protective immune response and their variation or conservation among variants, subtypes and serotypes. In addition, the analysis of epitopes profile may provide significant reference for studying in aspects of molecular recognition, molecular immunology, particularly in the field of the selection of appropriate candidate vaccine strains. Traditional methods for defining linear antigenic epitopes, especially those neutralizing antigenic sites in more detail, include cloning and sequencing escape mutants [32], fragmentation of proteins either by chemical cleavage or by enzymatic digestion [33], peptide scanned technology based on peptide array or synthesizing a large number of peptides or a set of overlapping peptides corresponding to the known amino acid sequence of a protein [34,35]. Though some antigenic sites in FMD viruses of serotypes O, A and C and other Picornaviruses have identified mainly by abovementioned methods, ELISA- based approach identifying antigenic sites was still developed quickly. In 1985, McCullough et al. [36] firstly reported the usage of the liquid phase ELISA (LP-ELISA) in the FMDV epitope identification. Following, ELISA using single or an overlapping set of peptides has been used to map epitopes on VP1, VP2, VP3, VP4 [37-41]. Recently, another approach to map FMDV-NSP infection-related B-cell epitopes and T-cell epitopes by analyzing overlapping peptides which were used in ELISAs as synthetic peptides [32,42-44] was described.
Since monoclonal antibodies define a specific region, a large number of viruses can be analyzed against a panel of Mab in a single test [45]. Such studies [46-50] provide a rapid measure of the epitope profiles of viruses, because non-reactivity of a particular Mab is indicative of a minor antigenic difference between strains [51]. Nevertheless, a competition ELISA-based approach has been used successfully to define the epitopes of FMDV [47,52,53]. For confirmatory purposes, refinements to this approach such as the use of Fab fragments of antibodies or profiling using site-specific mutant viruses should be considered. Furthermore, to estimate the relative proportion of anti-FMDV antibodies with different antigenic site specificities presenting in the antiserum from cattle, swine and sheep, conventionally immunized with O1 serotype vaccine, Aggarwal et al. [54] has used a capture competition ELISA in his work. As described for a non-serotype specific antigen detection ELISA, the identification of an epitope shared between all of the seven serotypes of FMD virus could be the basis of a non-serotype specific competition ELISA able to detect antibody to any strain of FMD virus. Due to their highly conserved nature, epitopes on the NSP's of the virus are the most likely candidates for such a site.
由于表现出了更多的准种的特点,自然隔离来自不同爆发的口蹄疫病毒的抗原性差异,这通常导致对那些口蹄疫流行株的疫苗缺乏有效的保护,甚至造成口蹄疫爆发。中,因此,的流行病学调查,以定期评估的野毒株的抗原特性的一个重要组成部分。有关的参考疫苗株的抗原相关性的场分离株连续监测将提供最多最新的知识在使用的疫苗病毒的疗效,并且还具有可应急接种的情况下,选择最适合的疫苗株。通过酶联免疫吸附试验用面板,其特征在于MABS抗原剖析[26]是用于选择用于疫苗匹配的代表性的病毒分离物的合适的方法。酶联免疫吸附试验也已被用来作为一种快速的方法,用于评估的关系的疫苗病毒株与野外病毒株收集[27]或那些从暴发和随后(LPB)液相阻断ELISA一直在使用,作为一种替代确定的保护性抗体反应的血清中和试验(SNT)[28,29]和评估领域的病毒抗原的关系[30,31]。酶联免疫吸附试验得到的结果是更合适的对注册成立o1/manisa到疫苗接种计划[31]。和使用多个单克隆抗体具有的优点,这是不太可能的是,一个字段的病毒将失败具有抗体识别的表位中的至少一个。抗体中和病毒感染提供保护,防止口蹄疫的一个重要机制。因此,它是重要的定义的表位,特别是那些引起保护性免疫反应和变型,亚型分型之间的变化或保护。此外,个人资料表位的分析提供重要的参考在分子识别,分子免疫学方面的研究,特别是在外地选择适当的候选疫苗株。用于定义线性抗原性表位,尤其是更详细地,中和抗原性位点的传统方法包括克隆和测序的逃逸突变体[32],可以通过化学裂解或酶消化[33]的蛋白质的碎片,肽肽阵列扫描技术的基础上,或合成大量的肽或一组的一种蛋白质的已知氨基酸序列相对应的重叠肽[34,35]。虽然主要是由上述的方法已经确定一些抗原性位点中的fmd病毒血清型邻,a和c,其他小RNA病毒,酶联免疫吸附试验为基础的方法,识别的抗原位点仍然迅速发展。在1985年,麦卡洛等。 [36]首次报道了使用的液相口蹄疫病毒表位的鉴定在酶联免疫吸附试验(线对,酶联免疫吸附试验)。以下,酶标使用单个或以重叠的组的肽已被用于地图抗原表位结构蛋白vp1,vp2基因,VP3,VP4 [37-41]。最近,地图FMDV-NSP感染相关b-细胞表位和T细胞表位的另一种方法,通过分析在作为合成肽的ELISA试剂盒使用的重叠肽[32,42-44]说明。
以来的单克隆抗体定义一个特定的区域大量的病毒可以在一个单一的测试分析,对一组人与生物圈计划[45]。这样的研究[46〜50]提供了一个快速测量配置文件的病毒的抗原表位,因为一个特定的人与生物圈计划的反应是未成年人之间株的抗原性差异的指标[51]。然而,竞争ELISA为基础的方法已被成功地用于定义口蹄疫病毒抗原表位[47,52,53]。为验证目的,改进这种方法,如使用晶圆厂片段使用位点特异性的突变体病毒的抗体或仿形应予以考虑。此外,估计从牛,猪和羊,常规免疫Aggarwal等人O1血清型的疫苗,抗血清中呈现不同的抗原位点特异性的抗口蹄疫病毒抗体的相对比例。[54]在他的作品中使用了一个捕捉ELISA竞争。所述非血清型特异性抗原检测酶联免疫吸附试验,所有七个的fmd病毒血清型之间共享的表位的识别可能是非血清型特异性竞争酶联免疫吸附试验能够检测到任何菌株的fmd病毒的抗体的基础上。由于其高度保守的性质,NSP的病毒的抗原表位是最有可能的候选人,这样的网站。
正在翻譯中..
由于准种特点,自然株口蹄疫爆发的病毒都来自不同的抗原性差异,通常导致疫苗缺乏有效的保护对口蹄疫流行毒株甚至导致口蹄疫爆发。它是,因此,的流行病学调查的一个重要组成部分的定期评估领域的抗原特性的菌株。相对于参考株疫苗株的抗原关系领域的连续监测提供了关于在使用疫苗病毒的有效日期知识也进入紧急接种情况选择最合适的疫苗株。抗原分析法的特点以及单抗[ 26 ]面板,选择有代表性的病毒株疫苗匹配合适的方法。ELISA法也被用来作为一种快速评估疫苗病毒株的病毒株与现场收集[ 27 ]或从爆发和随后的关系的方法,液相阻断(LPB)ELISA已被使用作为一种替代血清中和试验(SNT)确定的保护性抗体反应[ 28,29 ]和[ 30 ]评估领域的病毒抗原的关系。结果ELISA试验更适合对O1 /马尼萨纳入疫苗接种计划[ 31 ]。和多个单克隆抗体的使用具有的优点是,它是不太可能,一场病毒将无法拥有至少一种抗原表位的抗体确认。抗体中和病毒的感染提供了一个重要的保护机制对口蹄疫。因此,它是重要的定义的表位,特别是那些引起保护性免疫反应和变化或保护之间的变种,亚型和血清型。此外,表位形分析可以在分子识别,分子免疫学方面的研究提供重要的参考,特别是在合适的候选疫苗株的选择字段。传统定义的线性抗原表位的方法,尤其是那些中和抗原位点在更多的细节,包括测序的逃逸突变体[ 32 ]克隆,通过化学裂解或酶消化[ 33 ]的蛋白质碎片,基于肽的肽扫描阵列或合成肽或一组重叠对应于已知的蛋白质的氨基酸序列的肽【34,35】大量技术。虽然一些抗原位点在口蹄疫病毒血清型O,A和C和其他小RNA病毒主要通过上述方法确定,ELISA为基础的方法识别抗原位点还在快速发展。1985,McCullough等。[ 36 ]首先报道的液相试剂的使用(lp-elisa)在FMDV抗原表位鉴定。以下,ELISA使用单一的或重叠的肽已被用于地图VP1,VP2,VP3抗原表位,VP4 [研究]。最近,图fmdv-nsp感染相关的B细胞表位和T细胞表位分析重叠肽进行合成肽ELISA [ 32,42-44 ]被描述的另一种方法。
因为单克隆抗体定义一个特定的区域,大量的病毒可以分析对在一个单一的测试[ 45 ]面板的单克隆抗体。这样的研究[ 46-50 ]提供病毒的抗原表位分布的快速测量,因为一个特定的单克隆抗体的非反应性指示菌[ 51 ]之间的一个小抗原差异。然而,竞争ELISA为基础的方法已成功地用于定义口蹄疫病毒抗原表位47,52,53 ] [。为验证目的,改进这种方法,如抗体的Fab片段或使用定点突变病毒的分析应考虑使用。此外,与不同的抗原位点特异性抗血清呈现估计从牛抗口蹄疫病毒抗体的相对比例,猪和羊,常规免疫与O1群霍乱弧菌疫苗,Aggarwal等人。[ 54 ]利用捕获竞争ELISA在他的工作。As described for a non-serotype specific antigen detection ELISA, the identification of an epitope shared between all of the seven serotypes of FMD virus could be the basis of a non-serotype specific competition ELISA able to detect antibody to any strain of FMD virus. 由于他们的高度保守的性质,在NSP的病毒的抗原表位的是这样一个网站的最有可能的候选人。
正在翻譯中..
由于准种的特点,自然隔离来自不同的暴发表明多抗原的区别,这通常会导致疫苗缺乏有效的保护,针对这些口蹄疫流行株和甚至造成口蹄疫爆发口蹄疫病毒。因此,它是分离株的流行病学调查,定期评估领域的抗原性特征的重要组成部分。持续监测的有关参考疫苗株株的抗原关系将提供有关在使用疫苗病毒疗效最新知识和还具有访问权限,以选择最适合的疫苗株,如紧急疫苗接种。抗原酶联免疫吸附试验通过分析是使用 well-characterised Mab [26] 面板选择代表性的病毒株的疫苗匹配的合适方法。酶联免疫吸附试验也已被用作字段病毒株收集 [27] 或那些与评估疫苗毒株的关系,从爆发,随后,一种快速方法液相阻塞 (有限) 酶联免疫吸附试验一直在使用作为备用血清中和试验 (SNT) 中确定的保护性抗体反应 [28,29] 和评估领域病毒 [30,31] 的抗原关系。在酶联免疫吸附试验测试所得的结果是对疫苗接种程序 [31] O1/Manisa 纳入更合适。并使用多个单克隆抗体的优点在于它是不太可能一场病毒将无法拥有至少一个认可的抗体的抗原表位。化解病毒性传染性的抗体提供保护,防止口蹄疫的重要机制。因此,它是重要的是要定义抗原表位,尤其是那些引起保护性免疫反应及其变异或变种、 子类型和血清型之间的养护。此外的抗原表位配置文件分析可能提供很重要的参考学习方面的分子识别分子免疫学,尤其是在选择适当的候选疫苗毒株的领域。传统的方法,用于定义线性的抗原表位,特别是那些中和抗原性站点的详细信息,包括克隆和测序转义突变 [32],碎片的蛋白质由化学劈裂或酶消化 [33]多肽扫描技术基于多肽阵列或合成大量的多肽或一组重叠对应的 [34,35] 一种蛋白质的已知的氨基酸序列的多肽。虽然一些抗原站点在口蹄疫病毒的血清型 O、 A 和 C 和其他病症确定了主要由上述方法酶联免疫吸附试验-基于抗原物色了仍迅速发展。1985 年,卡洛中南工业大学 [36] 首先报道液相酶联免疫吸附试验 (LP-酶联免疫吸附法) 口蹄疫病毒的抗原表位鉴定中的用法。之后,使用单一的酶联免疫吸附试验或重叠的多肽组已被用来映射抗原表位在 VP1、 VP2、 VP3 VP4 [37-41]。最近,介绍了另一种方法,通过分析重叠的多肽,在检测作为合成肽 [32,42-44] 映射口蹄疫 NSP 与感染有关 B 细胞抗原表位和 T 细胞抗原表位.
由于单克隆抗体定义特定区域,可以针对单个测试 [45] 人与生物圈方案的小组分析大量的病毒。这种研究 [46-50] 提供快速检测病毒的抗原表位配置文件,因为非反应性的特定人与生物圈是指示性的 [51] 株抗原性差别很小。然而,竞争酶联免疫吸附法为基础的办法已被成功用于定义 [47,52,53] 口蹄疫病毒的抗原表位。为验证目的,应考虑 fab 抗体或使用特定于站点的突变病毒进行分析,如使用这种方法的改进。此外,估计的相对比例的抗口蹄疫病毒抗体具有不同的抗原网站从牛、 猪、 羊,O1 型霍乱疫苗,Aggarwal et al 常规免疫血清中提出的具体情况。[54] 已用于捕获竞争酶联免疫吸附法对他的工作。如所述的非血清型特异性抗原检测酶联免疫吸附试验,共享之间所有七个血清型口蹄疫病毒的抗原表位的鉴定可能非血清型具体竞争能够检测到任何病毒株的口蹄疫抗体酶联免疫吸附法的基础。由于其高度保守的性质,这种站点最有可能的候选人 NSP 的病毒抗原。
正在翻譯中..