Figure 1. Motility Properties of Kinesins with Extended Neck Linkers(A的中文翻譯

Figure 1. Motility Properties of Ki

Figure 1. Motility Properties of Kinesins with Extended Neck Linkers(A) Various lengths of polyproline and glycine-serine repeats, preceded by two lysines and followed by a single glycine residue, were inserted between the neck linker (red) and the neck coiled-coil domains (gray). As examples, insertions (black) of 2, 4, 6, 13, 19, 26 prolines (2P, 4P, 6P, 13P, 19P, and 26P) are expected to extend the neck linker length to 4.7, 5.4, 6, 8, 10, and 12 nm, respectively. The insert of seven repeats of glycine and serine (14GS) is depicted as a flexible 6 nm linker.(B) and (C) Average run lengths and speeds of single GFP-tagged kinesin molecules at 1 mM ATP (mean ± SEM, N = 110–187).(D) Maximum ATP turnover rates of GFP-tagged kinesin dimers are similar at saturating microtubule concentrations (mean ± SEM, N = 3 protein preparations).(E) Calculated coupling ratio of mechanical stepping to ATP hydrolysis. See Supplemental Experimental Procedures for details of these calculations.
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如图1所示。颈部接头(红色)和颈部卷曲螺旋结构域之间插入蠕动动蛋白与延长的颈部连接子(一),前面两个赖氨酸,然后由一个单一的甘氨酸残基,各种长度的多聚脯氨酸和甘氨酸 - 丝氨酸重复(灰色)。作为例子,插入(黑色),2,4,6,13,19,26脯氨酸(2P,4P,6P,13P,19P,和26P)预期延长颈部连接器的长度分别为4.7,5.4,6,8,10和12处,。被描绘成一个灵活的连接器6处的甘氨酸和丝氨酸(14gs)7重复插入(二)及(c)单一的GFP标记的驱动蛋白分子的平均运行长度和速度在1毫米ATP(平均值±标准差,正= 110-187)。(四)最大ATP周转率GFP标记的驱动蛋白二聚体类似的微管在饱和浓度(平均±扫描电镜(SEM),n = 3的蛋白制剂)(e)计算值耦合比机械步进ATP水解。这些计算的详细信息,补充实验程序。
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图1。具有延长的颈部连接子驱动蛋白运动特性(一)不同长度的多聚甘氨酸和丝氨酸重复,之前两个赖氨酸,然后由一个单一的甘氨酸残基,分别插入颈部的连接器之间的(红色)和颈部卷曲螺旋域(灰色)。作为例子,插入(黑色)2,4,6,13,19,26的脯氨酸(2P,6P,4P,13p,19P,和开发)预计将延长的颈部链接器的长度为4.7,5.4,6,8,10,和12纳米,分别。七重复甘氨酸和丝氨酸的插入(14gs)被描述为一个灵活的6 nm的连接器。(b)和(c)单GFP标记的驱动蛋白分子在1毫米ATP平均运行长度和速度(平均±SEM,N = 110–187)。(D)的GFP标记的驱动蛋白二聚体最大ATP周转率在饱和的微管的浓度是相似的(平均±SEM,N = 3蛋白制剂)。(E)计算步进机械ATP水解耦合比。看到这些计算的细节补充的实验程序。
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图 1。驱动蛋白动力性能与扩展的脖子 Linkers(A) 各种长度的多聚脯氨酸、 甘氨酸丝氨酸重复,由两个 lysines 开头并后跟由一个单一的甘氨酸的残留物,被脖子上链接器 (红色) 和脖子盘绕线圈域 (灰色) 之间插入了。作为例子,插入 (黑色) 2、 4、 6、 13、 19、 26 prolines (2 P、 4 P、 6 P、 13 P、 19 P和 26 P) 预计将延长到 4.7、 5.4、 6、 8、 10、 和 12 的颈部链接器长度毫微米,分别。甘氨酸和丝氨酸 (14GS) 的七个重复序列插入被描述为灵活 6 毫微米链接器。(B) 和 (C) 平均运行长度和单一的绿色荧光蛋白标记的驱动蛋白分子的速度在 1 毫米 ATP (意思是 ± SEM,N = 110–187)。(D) 最大的绿色荧光蛋白标记的驱动蛋白二聚体的 ATP 更替率是类似在饱和浓度微管 (意思是 ± SEM、 N = 3 蛋白制剂)。(E) 计算的机械步进到 ATP 水解耦合的比率。这些计算的详细信息,请参阅补充实验程序。
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